细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]这个SKOV3是被什么污染了吗？？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 11  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]这个SKOV3是被什么污染了吗？？

cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
1

发表于 2012-4-29 14:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]这个SKOV3是被什么污染了吗？？




我培养过卵巢癌细胞SKOV3, 一直都养不好，可能是因为之前师兄换了培养液得关系（之前细胞买来的时候使用Maccoy'5A，后来被师兄换成了1640）。而且我接手的时候是经过从液氮中复苏的，总之细胞就老不长，要不然就是换液不久就在平底出现细沙一样的东西，整平都是，使用胰酶消化下来，换新的瓶子，就能好一点，但是没有多久，又是老样子，有时候一个月，细胞都不能分瓶。但是一直细胞的培养液都是不浑浊的。

最近因为细胞长得不好，所以买来了细胞公司配置好得Maccoy'5A，换了之后，细胞没有出现那么多得细沙状的东西了，但是细胞变成了下面图片的样子，生长在上周刚刚有了一点起色，但是前几天开始，慢慢变得像是被什么给咬过了一样，看得我心疼啊，细胞内也出现过空泡，到底这些细胞是怎么了……同时，同一个培养箱内其他的细胞也出现了污染。

培养液一样看起来是不浑浊的，但是在高倍镜下，看到有可以动得黑点，好像是在自己旋转，又好像可以到走动。 反正仔细看的时候，是可以动的。黑色仔细看的话，好像是两到三个椭圆的点组成的。不知道是什么呢？？？

单独培养了培养液，看似有黑点，但是不很确定，因为没有细胞作对比，界面调的不很清楚。请各位高手指教一下啊！！着急啊！！


查看积分策略说明
附件
2012-4-29 14:06
45044800.snap.jpg (61.79 KB)
 
顶部
cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
2

发表于 2012-4-29 14:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细胞内的黑点老在细胞之间转来转去。看得我发慌


查看积分策略说明
附件
2012-4-29 14:06
45073899.snap.jpg (43.79 KB)
 
顶部
cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
3

发表于 2012-4-29 14:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这个是使用新的培养瓶装的新买来得培养液，照片中间的黑点，仔细看得时候会动，但是不确定是不是液面震动导致的。而且很难调的清楚……但是肉眼看液体是清亮的


查看积分策略说明
附件
2012-4-29 14:06
63737532.jpg (65.68 KB)
 
顶部
fsdd817[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78590
精华 1
积分 590
帖子 795
信誉分 102
可用分 4841
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-30
状态 离线
4

发表于 2012-4-29 14:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

帮你一把，你的情况我遇到过，我认为是污染了，用环丙沙星可以解决。
顶部
cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
5

发表于 2012-4-29 14:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问是怎样的剂量呢？ 怎么使用，这个会对细胞有影响吗？请您告诉我，谢谢！！您的情况后来解决了吗？
顶部
owanaka[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76900
精华 0
积分 395
帖子 510
信誉分 100
可用分 3337
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-10
状态 离线
6

发表于 2012-4-29 14:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的细胞HSC-T6是师姐以前冻存的，一直存在此种黑点，无论是培养基和细胞里面都有，虽然不影响生长，但状态老是不好。打算重新买或者做原代
顶部
cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
7

发表于 2012-4-29 14:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我曾经从细胞公司买过细胞，可以来得时候细胞上也有黑点，不过不是在背景中，因为没有正常的细胞的对照，也不知道是不是这个新买来的细胞本身也有问题……买回来之后状态也不好……而且细胞中也有很多空泡，不知道是不是传代太多了……

楼上的朋友，请问你要怎么“做原代”？？？
顶部
cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
8

发表于 2012-4-29 14:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用双抗来浸泡细胞，污染的东西似乎没有减少什么，但是细胞且死了不少……真的崩溃了，复苏了以前师兄冻存的细胞，也有类似的情况啊！！
顶部
cj_mondy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76095
精华 0
积分 627
帖子 853
信誉分 100
可用分 5201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
9

发表于 2012-4-29 14:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
细胞慢慢死去，不死的那些，好像也停止了生长了，慢慢老死了……裂解了
顶部
wmp1234[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79925
精华 0
积分 588
帖子 855
信誉分 100
可用分 5078
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-17
状态 离线
10

发表于 2012-4-29 14:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

借助楼主的帖子请教一个很急的问题
L02转染了质粒，挑选单克隆后部分克隆的培养板上面出现很多细沙样东西，贴壁。最终细砂样东西会越来越多，细胞停止增殖最终全部被细砂样东西取代。
转染了质粒的细胞我养了几个月啊，有什么方法解决没有？
顶部
 11  1/2 12››