[求助]HepG2用什么方法转染好啊？！

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标题:[求助]HepG2用什么方法转染好啊？！

hold住[使用道具]
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发表于 2012-5-2 13:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

本来打算用脂质体转染HepG2，可是问了Invitrogen公司，他们说脂质体的转染效率只有10%，不知道用啥方法好呢？大家给个建议。
小女子在这多谢了！

u234[使用道具]
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发表于 2012-5-2 13:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

lipofectamine2000吧，我有一同学以前就用这个转的，转染效率还可以。你可以试一下，如果实在不行就用电转吧。

hold住[使用道具]
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发表于 2012-5-2 13:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

Invitrogen公司的技术顾问说lipofectamine2000的转染效率只有10%，所以郁闷住

greenbee[使用道具]
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发表于 2012-5-2 13:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

差不了多少了.也就这个10%左右.不过你可心试试除了lipo以外的其它公司的试剂.比如罗氏的,还有一些国产的.

dotaaa[使用道具]
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发表于 2012-5-2 13:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

lipofectamine2000转染有几个注意的地方，做得好的可能到20%以上，我曾经试过的。
1.一定要用invitrogen的opti-MEM,会比用自己的MEM效率要搞很多。
2.HepG2代数要少，最好是复苏以后传一两次就可以做转染了，这样效率比较高一些。
3.hepG2不容易消化开，最好消化的散一些比较好。

另外我试过Roche的产品，那个Fugene HD 似乎效果确实是比lipo要好，价钱上好像也像差不多。搂主有条件的话不妨试试。

qhyu[使用道具]
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发表于 2012-5-2 13:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你问了哪里的技术顾问阿，hepG2用LP2000的效率绝对不止10%，我做过预实验的。

S6044[使用道具]
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发表于 2012-5-2 13:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

lipo2000转染hepg2效率确实比较低，细胞密度低一点，转染效果好一点。
Fufene没用过，听说效果不错。
传统的磷酸钙法也可以尝试

hold住[使用道具]
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