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标题:[求助]马上就要养细胞了,现在最需要干什么?

cocacola[使用道具]
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[求助]马上就要养细胞了,现在最需要干什么?




培养成纤维细胞。除了仔细看试验步骤和资料以外,现在需要提前处理什么事情,需要提前买什么东西呢?我想把这些该做的事情在实验开始前搞定
真诚求助
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BUK[使用道具]
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买血清,培养基,双抗,无菌培养瓶/皿,枪/枪头(灭菌),酒精(75%),胰酶,酒精喷壶,无菌吸管,酒精棉球,封口膜,酒精灯,镊子,剪刀,计数器,玻片,台盼蓝
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04906[使用道具]
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1、把泡玻璃器皿的酸配好,把装培养基的瓶子、移液管等都找齐,刷净,泡酸后,再高压灭菌备用;细胞培养室、培养箱和超净台也要擦净,紫外线照过;
2、把培养基和胎牛血清准备好,如果是养原代的话,虽然成纤维细胞很好养,但还是用进口的FBS比较好,成功率高;
3、如果是做原代的话,可以先练习取细胞的过程,熟练掌握,严格无菌;
4、把你实验所需的培养瓶、培养皿、或其他特殊需要的试剂都要事先找公司订好,因为如果是进口试剂的话,国内代理那里又没有现货,则至少要一个月才能到货。
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买血清,培养基,双抗,无菌培养瓶/皿,枪/枪头(灭菌),酒精(75%),胰酶,酒精喷壶,无菌吸管,酒精棉球,封口膜,酒精灯,镊子,剪刀,计数器,玻片,台盼蓝

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这些东西都要自己买?实验室没有??
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yueban-1147[使用道具]
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首先要熟悉的是自己所在的实验室(培养室)的一些规定:
1、其中涉及到好多细节,例如使用超净台的位置要固定,不要随便更换位置;使用其他人的位置要征得别人的同意;拖鞋要固定,不要穿别人的拖鞋,
2、洗手时水龙头不要开的太大,防止水溅到无菌服上;洗手时要将腕部10cm以内的部分也要用香皂洗干净
3、每次使用超净台后要检查废物缸是否已满,酒精棉是否已用完;
4、弄明白哪些是公用器物,哪些是他人物品,各个实验室的情况不一样,尤其是不同导师的研究生共用相同实验室的时候尤为重要,一般来说像(酒精,酒精喷壶,无菌吸管,酒精棉球,,酒精灯,镊子,剪刀,计数器,玻片,台盼蓝)是共用的,至于自己要买什么试剂,如果上边有师兄师姐的话,这些倒不用担心,问问师兄师姐或实验员就可以了。
5、掌握好无菌操作:
可以跟着师兄师姐做几次,先不要着急自己动手,多看、多问、多学习、多动手。从血清的灭活与分装测试、培养基的配制、胰酶的配制与分装缓冲液的配制,细胞的培养……
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fsdd817[使用道具]
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如果实验室已经有人培养细胞,很多东西直接在实验室负责老师那里领取,不过培养基、血清、胰酶、DMSO、双抗、培养瓶/培养皿之类的是自己购买,即使有最好也不要共用。
然后就是耗材和器皿的清洗、干燥与消毒了,例如滴管、各种型号的吸头、15ml/50ml离心管、1.5mlEP管、冻存管之类的,清洗--浸酸--清洗--烘干--高压--烘干备用;培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒。
我也是才养细胞的,上述建议供你参考下。
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fsdd817[使用道具]
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各种大小的瓶子,还有各种要用的液体,细胞培养用的东西,建议最好个人专用,器皿能干烤的最好干烤
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xue258[使用道具]
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订购培养基 血清 胰酶 PBS 培养瓶 滴管 离心管
然后准备分装血清的100ml玻璃瓶10个(因为血清规格多为100ml,配成10%培养液)装胰酶25-50ml玻璃瓶2个 装PBS的500ml玻璃瓶2个
所有玻璃器皿洗净烘干泡酸再洗净烘干(准备两个烘干用的篮子) 消毒 备用 塑料或橡胶塞则洗净烘干蒸馏水煮30min 烘干 消毒 备用
准备消毒用的包布两个 可替换用 装各种器皿的铝制盒子数个 酒精棉球擦拭 内垫牛皮纸及纱布 玻璃瓶均包好纱布及牛皮纸(消毒前的准备)
最后准备酒精灯 镊子 剪刀 广口玻璃瓶 消毒用酒精 棉球 吸耳球 酒精喷壶 橡胶手套
接着就可以开始养细胞了
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zsxan1990[使用道具]
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学习一下细胞培养细胞的基础知识和基本技术,结合自己实验室的具体条件进行一些必要的前期准备。

又一个新的实验周期要开始了,刚开始细胞培养的新手,都会有这样的 疑问,请大家广泛展开讨论,另外,请多搜索学习!
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fei1226com[使用道具]
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这些东西都要自己买?实验室没有??

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笨死了,去实验室看看,有的当然就不用买了!当然有时候有的东西有,但并不一定都是公用的,你也得买。问好先,不要到时人家不借你用呢,有的地方的实验室都是各管各的,连枪都有可能被瓜分了,何况小东西。
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