[求助]细胞中的黑颗粒

细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]细胞中的黑颗粒

33 1/4 1 2 3 4 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]细胞中的黑颗粒

c86v[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 77054
精华 0
积分 442
帖子 584
信誉分 100
可用分 3741
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态离线

发表于 2012-5-2 16:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的细胞最近老师出现黑色的颗粒，大的可以成团，接种后两三小时观察就可以看到好多黑色的，细胞都看不太清了，颗粒不动。师姐跟老师都说是细胞碎片，但是细胞碎片会出现这么快，这么多吗？会不会是污染？换液冲洗后可以减少很多，换液后细胞可以长，但是状态不好。求助高手指导

ha111[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 72969
精华 0
积分 821
帖子 1239
信誉分 101
可用分 7048
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态离线

发表于 2012-5-2 16:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #1 c86v 的帖子

有照片吗？我也遇到过，但是不是道你说得黑颗粒是在细胞之间还是细胞上得……我也想知道到底是怎么了

redbutterfly[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 76433
精华 0
积分 701
帖子 1102
信誉分 100
可用分 6281
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态离线

发表于 2012-5-2 16:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

出现以上黑色不动的颗粒有两种情况：
1.支原体污染。细胞周围都是，换液颗粒减少，但见快速生长，细胞张至40%以上，成片脱落。2.细胞衰老导致凋亡，产生碎片，换液后会减少。
根据你的描述，可能是支原体污染，建议换新的细胞重新培养。

kewanqi2011[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 76114
精华 2
积分 534
帖子 660
信誉分 104
可用分 4146
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态离线

发表于 2012-5-2 16:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

同意楼上，但最好是上图片看看。最好是高倍镜拍的。

mimili_901[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 73543
精华 0
积分 564
帖子 723
信誉分 102
可用分 4458
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态离线

发表于 2012-5-2 16:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

三楼的说换液颗粒减少，但见快速生长，是什么快速增长呢，我用HBSS冲洗几遍后换液黑点不见增多呀，但是原代培养第二天神经元长的没有正常的形态，是那种肿大的，感觉像被什么掏空了，只剩个躯壳了那种，换液后慢慢开始好一点，有神经元正常的形态。

mimili_901[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 73543
精华 0
积分 564
帖子 723
信誉分 102
可用分 4458
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态离线

发表于 2012-5-2 16:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我用的是0.1%的胰酶消化13-15 分钟，10%FBS的DMEM/F12终止消化，HBSS冲洗，各种液体都已经反复配置了N 遍，还是一样。神经元明显感觉是缺乏营养那种状态，郁闷

mimili_901[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 73543
精华 0
积分 564
帖子 723
信誉分 102
可用分 4458
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态离线

发表于 2012-5-2 16:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

支原体污染不是不容易观察吗？我的细胞接种时看上去还可以，隔2-3小时看就开始有很多黑色的团块了，细胞之间，严重的时候细胞都被遮盖的看不见了，要用HBSS冲洗好几遍细胞才能看到，第二天换液的时候看到的细胞就很脆弱，感觉风一吹就不见了似的。好的时候换液后2-3天逐渐有神经元的形态，胞体透亮，很多时候还是不怎么好。
支原体存在与什么地方呢？我的培养基都做了培养基试验没有问题，所用的液体有都换了很多次，而且都用微孔滤器滤过的。金属器械和玻璃器皿整个实验室的处理方法都一致呀，为什么我的养不好呢？
支原体有什么好的办法解决吗？

zwsyrt[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79787
精华 0
积分 594
帖子 867
信誉分 100
可用分 5136
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-15
状态离线

发表于 2012-5-2 16:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

0.1%的胰酶消化13-15 分钟,时间好像太长了吧？建议你在吸去培养基后，消化前用高压的pbs洗一遍，这样可以吸取细胞间的残留培养基，还可以洗去所谓的黑点，而且很容易就消化下来，你所说的黑点我们在细胞培养中也经常遇到，可能是培养基里面的血清结晶或其他，至于你细胞传代后长的状态不好，考虑是消化时间太长了，影响细胞活力，我们平时几分就可以消化下来我们实验室也有人在养神经元细胞，养的很好

mimili_901[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 73543
精华 0
积分 564
帖子 723
信誉分 102
可用分 4458
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态离线

发表于 2012-5-2 16:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我一直是做的原代呀，不是传代，而且我们实验室养神经元一直是消化这麽长时间的呀，我们实验室去年11月细胞间整修了一个月，之后我的细胞就一直这样了

misswu61[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79547
精华 0
积分 747
帖子 774
信誉分 100
可用分 4691
专家分 100
阅读权限 255
注册 2011-12-13
状态离线

发表于 2012-5-2 16:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

细胞碎片还是污染？

[ 本帖最后由 misswu61 于 2012-5-2 16:59 编辑 ]

附件

2012-5-2 16:59

14599905.snap.jpg (33.39 KB)

33 1/4 1 2 3 4 ››