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标题:转帖 谈谈我对飞行时间质谱仪(TOF)的理解

dingdang[使用道具]
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转帖 谈谈我对飞行时间质谱仪(TOF)的理解

1.TOF对大分子(MW>1000)为唯一选择,除非你很有钱,可以玩回旋共振FT-MS。

2.TOF是一款以定性为主的仪器,定量绝对不要指望它有出色表现,可以做一些定量,定量精度不如QQQ,但是它还是有极高的灵敏度,对低残留物的定性也很出色。

3.TOF是一款研究级的设备,非检测实验室使用,如食品安全(如苏丹红)用,当然它也可以做这些事情,但这些检测标准定量的法规均为QQQ设计。

4.TOF对小分子表现也很出色,MW<500,可以直接由精确分子量推断分子式,500<MW<1000,配合元素分析结果可以由精确分子量推断分子式,当然可能给你的分子式不止1个,因为化合物是在太多,但如果你有对照品或者对你的样品很熟习的话,那就爽歪歪了。

5.谈谈离子源配置,ESI是基本配置,作蛋白就加MDI, APCI就看个人喜好了

6.TOF的优点是:可以先做试验,只要有信号,完了可以慢慢处理数据,做EIC啊,算分子式。。。缺点是数据太大,计算机都有点忙不过来。。

7.优点二是:高精度的分子量测定了(误差3PPM是没有问题的),重点之重点,但是我强调HPLC的分离,分离利于寻找分子离子峰。

8.谈谈仪器:大家最关心的就是误差3PPM如何保证了,这确实很难。
8.1首先飞行筒要保证基本没有长度变化,大部分仪器提出对实验室温度的苛刻要求(控制实验室温度波动范围),另外很多仪器把飞行筒做成开水瓶内胆式真空夹层,结果就不用说了,当然看大家的实验室硬件了。
8.2其次是仪器整体元件电压的稳定与重现,瞬时高压瞬时回来,电压值不能飘移,这个就是仪器牛B的地方。
8.3第三是仪器的校正问题,我说的是测试中的时时内标校正,一边喷内标液,一边喷样品溶液。安捷伦和布鲁克联合设计的ESI离子源双喷雾针垂直喷雾,我觉得是最佳设计。WATERS公司的Z型喷雾,我觉得是用于QQQ的最佳设计,因为QQQ确实需要抗污染强的离子源,但Z型喷雾对研究级的TOF我觉得是不利的。
8.4关于3PPM的精度维持,我用的安捷伦的TOF,实际经验每天1次调谐,不开时时内标喷雾,可以控制误差6ppm没有问题,开启时时内标喷雾,3ppm的结果是没有问题的,但实验室必须配备一流的空调并24小时开机。

另:液质1年关机不要太多,建议不超过3次,有时间再和大家讨论TOF检测器和源内CID的问题。
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longcz[使用道具]
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小弟用ABI的Qstar一年多了,呵呵,这种ESI-Q-TOF类的仪器的确很娇气,对环境要求极高,偶们实验室常年20度恒温,40%恒湿,导致后果就是,偶觉得夏天冻,冬天热……
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snow_white[使用道具]
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我怎么觉得TOF配MALDI比较好,从理论上讲,在真空下受各种温度、气流的干扰小;

而如用ESI接TOF,因为是大气压下的,应该很容易漂移。

另外,内标有时会抑制样品信号吧。真的可以常使用内标么?


[ 本帖最后由 snow_white 于 2007-7-18 17:24 编辑 ]
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现在听说好象Thermo的Orbitrap做大分子也不错,价格好象没有FT那么贵。
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dingdang[使用道具]
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QUOTE:
现在听说好象Thermo的Orbitrap做大分子也不错,价格好象没有FT那么贵。

直观地测定一个大分子的分子量,即最好不是多电荷的,还是MALDI-TOF为佳。Orbitrap也是要靠精细分辨多电荷、decovolution出大分子分子量的。

偶个人认为,楼主用的LC-TOF,就是有机合成的人用来发文章用的。其它的时候,地位相当尴尬,说起来就是一个单级液质,但可比单级四极杆液质贵老鼻子去了。然后要想得到稳定的几个ppm级别的测定结果,就总是要呵护倍至,单纯的LC-TOF,真想不通为什么要买这种仪器?MALDI-TOF、Q-TOF都要有用得多。

哦,想起来啦。安捷伦这个公司销售个个都太厉害,卖什么就把什么吆喝地神乎其神,其实,LC-TOF是早被AB、Waters淘汰的技术了。可安捷伦一出此仪器,就惹得一堆人来买。pfpf!

补充一句,安捷伦自从出了Q-TOF,就不吆喝它的LC-TOF啦。现在也到处去跟人讲Q-TOF神乎其神。炒剩饭的本事实在大也!天下无人能比!

[ 本帖最后由 dingdang 于 2007-7-18 17:32 编辑 ]
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QUOTE:
直观地测定一个大分子的分子量,即最好不是多电荷的,还是MALDI-TOF为佳。Orbitrap也是要靠精细分辨多电荷、decovolution出大分子分子量的。

个人认为deconvolute的结果可信度更高,因为信息多了

但是我怀疑obitrap的质量范围不够大,以前maldi都是拿近70k的bsa来做例子说明质量范围的,orbitrap用的都是不超过20k的
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