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标题:[求助]支原体污染需要用环丙沙星杀多久啊?

chuntian1983[使用道具]
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发表于 2012-5-3 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]支原体污染需要用环丙沙星杀多久啊?



我好不容易晒出的稳转细胞系
回家一趟都冻起来了.
现在复苏发现有支原体污染,用环丙沙星杀了后，状态好转.
听实验室老师说支原体污染要用环丙沙星10ug/ml杀一个星期,再用1ug/ml一直维持到实验结束.
但是在园子里搜了下,大家都说怎么杀,没有涉及杀多久的问题.
不知道有没有这方面的专家能够给予回答啊
我怕一直用药对实验结果有影响的
请问做蛋白质相互作用,用这种污染后的细胞可以吗??
急求答案,实验就这样停滞了.难道要重新筛细胞吗?又是漫长的过程啊~~~~
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00无名指00[使用道具]
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发表于 2012-5-3 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是做支原体检测了吗？肉眼可见什么了吗？
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chuntian1983[使用道具]
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发表于 2012-5-3 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

肉眼可以看到小颗粒状的东西,培养基浑浊,细胞生长停滞,最主要是用环丙沙星杀有效.
但是不知道要杀多久啊
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发表于 2012-5-3 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

培养基浑浊的话一般不是支原体污染，支原体污染的细胞培养液应该是清亮的，楼主的可能是细菌污染吧
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chuntian1983[使用道具]
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发表于 2012-5-3 16:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #4 00无名指00 的帖子

哦,我没说清楚,培养基是清亮的,但是里面有很细象沙子一样的东西铺在下面.我们实验室有经验的老师看了说是支原体污染,而且我现在用环丙沙星杀有效,细胞现在长的速度快了,沙子一样的东西也基本没有了.
我的问题就是要一直杀多久
用药杀支原体对我后面做蛋白质相互作用有没有影响啊.
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2012-5-3 16:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问大家的环丙沙星是在哪里买的，好像没有细胞培养级别的，需不需要化学分析级别的呢
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发表于 2012-5-3 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果我没记错的话，支原体敏感的药应该是红霉素或是阿奇霉素吧？
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dog002[使用道具]
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发表于 2012-5-3 17:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 chuntian1983 的帖子

建议换细胞株！！！！！！
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dog002[使用道具]
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发表于 2012-5-3 17:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你导师的说法是准确的
1.cure process
在细胞的倍增时间恢复正常前至少传代五代，此时的传代比例可以1：2-1：4之间，当细胞恢复正常生长速度后，1：4-1：8比例传代3代
2.维持阶段
更换成维持剂量培养基，细胞1：4-1：8传代五代
3.撤药检测
撤药后传代三代，检测。注意保存维持阶段细胞。
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chuntian1983[使用道具]
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发表于 2012-5-3 17:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不好意思,最近实验很忙,才看到各位的留言,谢谢拉
现在细胞已经换成维持剂量的环丙沙星了
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