小中大[求助]MTT异常结果
各位路过大侠,救命呀,晚生最近做了几次MTT,结果各个抑制剂浓度组细胞存活率相差不大,甚至有的抑制剂组细胞0D值比阴性对照最还大,显微镜下看的时候,各个浓度组差异很明显呀,但是一测OD值就差别不大了。不太想是污染,我加MTT的时候没有出现颜色立刻变化呀。但是我有一块板子加DMSO时候,空白对照组竟然也出现了一点红色,空白对照没加细胞应该在加DMSO后为无色的溶液才对呀。
怀疑:1.细胞培养基被污染了(因为空白组没有细胞加DMSO出现了红色)。2.MTT和抑制剂发生反应了(之前做另一种抑制剂是出现同样情况,但用 PBS洗后再加MTT就好了),我把此次用的抑制剂放MTT一起后没有什么变化,所以可能性比较小。3.细胞出问题了(我的细胞培养过程中一直发现瓶子里有黑点,不动,也不影响细胞生长),可能性也不大.大侠们帮我分析一下吧。我把结果给你们看看。
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OD 平均值
空白 0.145 0.119 0.114 0.116 0.132 0.125
400 0.431 0.477 0.408 0.421 0.460 0.439
80 0.450 0.390 0.411 0.491 0.455 0.439
16 0.370 0.473 0.394 0.556 0.477 0.454
3.2 0.580 0.426 0.629 0.517 0.319 0.494
0.64 0.519 0.666 0.573 0.584 0.518 0.572
阴性 0.417 0.488 0.469 0.500 0.535 0.482
平常的空白对照都是0.08左右
另一块板子用的是同样浓度,结果如下:
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OD 平均值
空白 0.095 0.087 0.092 0.086 0.088 0.090
400 0.618 0.527 0.444 0.572 0.434 0.454 0.508
80.0 0.291 0.391 0.461 0.447 0.409 0.500 0.417
16.0 0.374 0.445 0.459 0.376 0.507 0.414 0.429
3.20 0.418 0.667 0.670 0.555 0.570 0.755 0.606
0.64 0.638 0.897 0.568 0.676 0.681 0.539 0.667
阴性 0.689 0.534 0.615 0.533 0.537 0.532 0.573