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标题:[求助]用DMSO溶药后用加血清的培养基稀释还是用无血清...

bongte[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]用DMSO溶药后用加血清的培养基稀释还是用无血清...




请教各位群友，我的细胞是用含10%血清的培养基培养的。现在我用DMSO溶药配成浓缩液后，应该是用加血清的培养基稀释还是用无血清的培养基稀释
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ero11[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 bongte 的帖子

我认为应该用无血清的培养基稀释药物，个人意见，仅供参考。
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qumm1985[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是用有血清的培养基稀释药物，我师姐是这样教的，我也不知道有影响没？
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bongte[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
感谢楼上几位！我还想问一下，用DMSO溶了粉末的药物之后，要放在4度之下让它完全溶解之后再分装放在负20度下保存，要在4度下放多久？
还是放在室温下让它溶？要在室温下放多久？
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kswl870[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这个不同药物是不一样的，我做的两个药物，一个加了DMSO马上就溶了，另一个是放了一夜第二天看才溶的。如果放负20的话DMSO会结晶的。
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发表于 2012-5-7 12:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请教各位战友，我的细胞是用含10%血清的培养基培养的。现在我用DMSO溶药配成浓缩液后，应该是用加血清的培养基稀释还是用无血清的培养基稀释

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个人觉得最好用无血清的培养基稀释。为什么呢？我是这样考虑的，血清中含有的大量蛋白，或多或少都会结合药物小分子，特别是对于一些血浆蛋白结合率高的药物小分子。只有游离的药物小分子才比较容易透过细胞膜进入下拨发生相应的生理效应；与蛋白程结合态的药物小分子，一般进不了细胞。这个跟我们人体吃了药物之后进入人体血液的药物的情况差不多。这些都只是个人看法，如有不同意见，欢迎讨论。
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bongte[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那第二个问题用DMSO溶了粉末的药物之后，要放在4度之下让它完全溶解之后再分装放在负20度下保存，要在4度下放多久？
还是放在室温下让它溶？要在室温下放多久？
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bongte[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个不同药物是不一样的，我做的两个药物，一个加了DMSO马上就溶了，另一个是放了一夜第二天看才溶的。如果放负20的话DMSO会结晶的。

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那是不是不能放在负20度啊？我的药太贵了，我不敢贸然行事啊，所以想请教你一下
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u234[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果是DMSO本身结晶了再融倒是不会影响实验。但是因为不同药物理化性质不相同，所以你的药是否可以溶在DMSO里放在负20我也不是很清楚。我个人觉得还是不要反复冻融的比较好，如果能常温尽快做完还是常温保存吧，是不是涉及避光的问题请你根据药物性质考虑。
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kswl870[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你如果用无血清的培养基稀释，稀释完把药加入培养的细胞中。那么你培养的细胞用的培养基中没有血清吗？如果是的话，那这样做还有意义。如果培养细胞的培养基中也有血清，那么你加无血清的有何意思？
一般用与培养细胞的培养基稀释就行，细胞用的什么培养基，稀释就用什么培养基。当然为了节省培养基，在稀释的前几步可以用PBS稀释，在最后加入细胞前一步的浓度用培养基稀释。
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