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标题:[求助]如何处理黑胶虫??

xue258[使用道具]
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[求助]如何处理黑胶虫??




问一下有过黑胶虫污染经历的,需要怎样处理实验室,必须得甲醛熏蒸以后才能再复苏新细胞吗
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xue258[使用道具]
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甲醛熏蒸能否除掉黑胶虫???
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dotaaa[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 xue258 于 2012-5-7 12:52 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')



问一下有过黑胶虫污染经历的,需要怎样处理实验室,必须得甲醛熏蒸以后才能再复苏新细胞吗

BM cyclin
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xue258[使用道具]
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回复 #3 dotaaa 的帖子

那个不是治疗支原体污染的,有没有好的出黑胶虫的办法?
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dotaaa[使用道具]
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回复 #4 xue258 的帖子

目前貌似没有,我感觉细胞长得好的时候,黑胶虫的生长就被压制了。
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zsxan1990[使用道具]
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拜托,熏蒸只能杀菌,那些东西有些是寄生在细胞里面的!!
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jrwyyplt[使用道具]
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1、首先你要确定你的是不是黑胶虫

2、黑胶虫的特点

(1) 与细胞共生,细胞长的好或密度大的话,小黑点就少,反之则 多;
(2) 对抗生素无效;
(3) 可能通过培养箱空气进行污染;
(4) 单用培养液及血清培养没发现问题。
(5) 换掖冲洗后也无效。

以及

(6)形态上有些像细菌,直径约在0.5~1微米,
(7) 在400X倒置显微镜下,有典型的布朗运动(不规则的原地小距离抖动)。
(8) 细胞内好像也有存在,
(9) 但并不引起培养液混浊
(10) 时间稍长,细胞状态明显恶化,并最后死亡

3、目前常用的处理:
1).有人建议说,换好一点的血清(其实这样的原理就是让细胞长的好些,从而在一定程度上抑制黑胶虫)。

2).如果是贴壁细胞的话,可用无菌的PBS洗几次,可一定程度上缓解。

若是悬浮的话,就不太好处理拉,可以向其中少加一点滋养细胞(从小鼠腹腔内取的巨噬细胞,这种细胞不分裂,过一阵就死掉了,做抗体杂交瘤融合的同志肯定知道)。
加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效!还有就是实验环境要注意好,保持细胞间整个环境的洁净度。

3).换用进口的一次性塑料培养瓶(也就是处理好培养瓶方面的问题)。

4).建议清理无菌室所有物品,重新灭菌,用KMnO4熏蒸,
按首次使用无菌室做,细胞重新复苏。(估计这句是楼主主要想问的)

5). 在换液前先加入生理盐水并轻轻拍打,冲洗干净后再加入培养液,坚持天天洗,传代时加生理盐水再离心一次,接种密度稍大一些,一段时间后,虫子就会大大减少,对细胞的生长也不会有大的影响。
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tianmei001[使用道具]
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黑胶虫不是生命体,这个中国早在70年代就有定论,不用担心,我在日本也没听说过黑胶虫,问他们都没听说过,多洗几次细胞就没事了
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junjie05[使用道具]
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确实是这样的,我换过血清后就恢复正常啦。
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我认为黑胶虫很多是与血清有关系的,有的血清批次间就很不稳定,有的有污染,有的没有。
楼上总结的就很好,但是我觉得用双抗对黑胶虫还是有一定作用的,可以明显抑制其生长,但是没办法完全消灭。我的经验:要是污染不严重,可以通过换培养液或者血清,或者用多一点血清调整细胞状态来控制虫虫的生长,污染严重了就直接把细胞抛弃吧。
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