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标题:[求助]人脐静脉血内皮细胞培养

XYZQ[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]人脐静脉血内皮细胞培养



各位前辈好：我是新手，想养人脐静脉血内皮细胞我用DMEM培养基，用胰酶消化，我的师姐说要加肝素，但是她们忘记加多少了？请问需要加肝素吗？加多少呀？是针剂还是粉装的？希望养这个细胞的高人赐教，不胜感激。
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-5-7 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
肝素可以加，我们在养的时候一般是加100U/ml，用针剂的。
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XYZQ[使用道具]
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发表于 2012-5-7 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #2 zhenxin 的帖子

非常感谢，可是我不太明白，这100U/ml中的ml是指培养液的量吗？我买的针剂上面写的是2ml：12500单位，请问加在培养基里怎么换算呀？再次期望您的答复，谢谢！
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发表于 2012-5-7 15:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是这样的，肝素是12500u一只，一共2ml，你可以把它稀释到12.5ml，也就成了10000U/ml，然后在每100ml培养液中加入1ml就是100u/ml了，在有些文献写100ug/ml，其实是一样的。
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XYZQ[使用道具]
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发表于 2012-5-7 15:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

自己想了半天也没弄明白，结果你们一提醒问题就解决了，真的非常感谢，帮我解决了好多疑问，我是第一次养内皮细胞，希望你们这些高手多多指教，最后再次感谢！
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ha111[使用道具]
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发表于 2012-5-7 15:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问一下，养内皮细胞都要加肝素吗？其作用是什么？谢谢！
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wsll[使用道具]
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发表于 2012-5-7 15:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
大家好，我也是养的这个细胞，请问你们用培养基的FBS含量是多少啊？
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XYZQ[使用道具]
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发表于 2012-5-7 15:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我还想请问一下，用明胶包被培养瓶时，明胶消毒用真式滤器吗？配完的明胶很粘的。另外，我买的是10ml 的离心管，准备用几个离心管来收集胰酶消化后的含内皮细胞的液体，这与用50ml的离心管收集又很大的区别吗？我看好像都用的50ml的，我准备实验时忽略了这一点，刚记起来，请高手指教，谢谢！
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tangxin_80[使用道具]
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发表于 2012-5-7 15:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

区别我不知道,但是我一直用10ml离心管收集细胞,一直很好用.
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ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2012-5-7 15:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也要做这个细胞的培养,请问你们是购买的细胞株还是从脐带里取得的?哪一种效果好一些?谢谢
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