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标题:[求助]救命啊，污染了~

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发表于 2012-5-14 12:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]救命啊，污染了~




哪位群友见多识广，帮帮忙啊
看看是啥污染啊～

视野里，棒状的东西，会游动，多聚集在细胞周围，本来长得好好的细胞，一个晚上就全完蛋了～～郁闷死了～救命啊～


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2012-5-14 12:38
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tieshazhang[使用道具]
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发表于 2012-5-14 12:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你这是多少倍数？10×10？10×20？10×40？
“棒状的东西，会游动”，如果在高倍镜下看到的可能为黑角虫污染。
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ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2012-5-14 12:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

黑胶虫污染不会那么快就完蛋的
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831226[使用道具]
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发表于 2012-5-14 12:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你好！我最近也是在做原代分离培养的神经细胞，也出现了那种会走动的东西，不过比你的短点，我也弄不请这是怎么回事？而且培养液都变浑浊了，可能是污染了？可是细胞还能活啊？这到底是怎么回师啊？求各位大虾门赐教啊？
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发表于 2012-5-14 12:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主你看下和这个现象有多少相同的！
形态上类似与杆状细菌，但长度比细菌长，直径约在0.5~1微米，不染色观察为黑色；成熟后呈线状，在10X40下倒置显微镜小，有典型的布朗运动（不规则的原地小距离抖动），像黑色的小虫游来游去，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去。
要是和这个差不多的话就应该是黑胶虫了！！
最好的办法就是舍弃并进行全面的熏蒸杀菌，不过这样的话还是有一定问题，因为那真是黑胶虫的话它可能存在细胞中，现在关于这样的污染问题国际上解决的办法都比较困难！
关于4楼的问题我想应该不会是黑胶虫，因为黑胶虫不引起培养液混浊。你的可能是属于支原体，细菌或者原虫污染！！
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-5-14 12:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

非常典型的大肠杆菌污染，速度丢弃，这种污染在细胞培养中时有发生，不足为奇，请楼主注意操作的时候的无菌操作。我保证绝对是大肠杆菌污染
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-5-14 12:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你好！我最近也是在做原代分离培养的神经细胞，也出现了那种会走动的东西，不过比你的短点，我也弄不请这是怎么回事？而且培养液都变浑浊了，可能是污染了？可是细胞还能活啊？这到底是怎么回师啊？求各位大虾门赐教啊？

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能游动的绝对是生物了，有一些污染发生的时候细胞不一定马上就会死去，但是状态是绝对不行了，还是要注意操作中的无菌意识，尤其是开放操作的时候，是细菌混人的最常见原因，再次提醒各位新手朋友，注意无菌操作

[ 本帖最后由 owanaka 于 2012-5-14 12:43 编辑 ]
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idea2011[使用道具]
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发表于 2012-5-14 12:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看起来不像黑焦虫污染。应该是杆菌污染。这种污染很平常。细胞丢弃，重新解冻。应该没问题的。
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-5-14 12:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你好！我想请教以下你培养的是什么细胞?你只是大概说是神经细胞，所以请教一下你的细胞是用什么消化的？好消化吗？能不能传一长你的细胞照片看看呢？谢谢！
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duoduo[使用道具]
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发表于 2012-5-14 12:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我没有养过神经细胞，所以也不能给你提供图片，消化一般都用胰酶，加或者不加EDTA，我消化所有的贴壁细胞都是用不加EDTA的，消化的时候放到37°C孵育1分钟左右，镜下见到细胞质回缩间歇增宽的时候及时加含血清培养基终止反应，然后吹打就得了
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