[求助]DMEM中需要加入双抗吗?

细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]DMEM中需要加入双抗吗?

23 1/3 1 2 3 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]DMEM中需要加入双抗吗?

www.1[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 75147
精华 1
积分 533
帖子 641
信誉分 102
可用分 4121
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态离线

发表于 2012-5-15 13:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

本人要从大鼠肺中提取平滑肌细胞培养,文献中说DMEM中要有终浓度为100u/ml的青霉素和链霉素.但我师姐说,DMEM中最好不要有抗生素,对细胞有毒性.只需要洗肺的dhanks中双抗的浓度达到500-1000u/ml就可以.
请问各位.DMEM中是否需要双抗呢?假如需要的话,浓度又是多少?谢谢

utt0989[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 78340
精华 1
积分 660
帖子 975
信誉分 102
可用分 5663
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-28
状态离线

发表于 2012-5-15 13:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

DMEM中最好要加双抗，只是不要浓度太大，对细胞影响就不大，当然有的人说只要操作和实验用品消毒过关，就不会污染，但加适当的双抗也是为了保险。
我们实验室一般先是以PBS液配成10万ｕ/ｍｌ的待用浓度，以EP管保存在－20℃的冰箱中，每管中加入0.1ml的双抗PBS液，然后需要加到DMEM中时，每100ml的DMEM中加1管即0.1ml的双抗PBS液，这样终浓度就为100ｕ/ml。
祝你顺利。

abc816[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77362
精华 0
积分 775
帖子 1190
信誉分 100
可用分 6817
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态离线

发表于 2012-5-15 13:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

加双抗的目的是防止细胞污染，只要操作规范一般不会污染的，所以不加双抗也可以的，我用的是1640培养基，我们都不加双抗的

greenbee[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79370
精华 0
积分 710
帖子 1119
信誉分 100
可用分 6368
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态离线

发表于 2012-5-15 13:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们加了双抗的

HP007[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 74166
精华 0
积分 446
帖子 612
信誉分 100
可用分 3833
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态离线

发表于 2012-5-15 13:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

DMEM中不一定要加抗生素。我做细胞培养快一年了，一直没加抗生素细胞也没污染。不加抗生素培养得注意几点:
1.取材时要严格无菌操作，这是首要也是最关键的。
2.细胞活力要好，容易生长和增殖；比如骨髓基质细胞。
如果加双抗的话一般是青霉素100u/ml，链霉素100mg/ml.这种浓度的双抗对细胞的影响应该不大。

jujuba[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79697
精华 0
积分 612
帖子 903
信誉分 100
可用分 5331
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-14
状态离线

发表于 2012-5-15 13:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

青霉素水溶液不稳定怎么办，加了等于没加？

misswu61[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79547
精华 0
积分 747
帖子 774
信誉分 100
可用分 4691
专家分 100
阅读权限 255
注册 2011-12-13
状态离线

发表于 2012-5-15 13:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们也加双抗的，配培养液时1000mlDMEM中加青霉素62.5mg，链霉素100mg.再过滤。配转染细胞用的培养液不加双抗。

ladyhuahua[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 76658
精华 0
积分 984
帖子 1667
信誉分 100
可用分 9116
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-8
状态离线