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标题:[求助]神经元不长是什么原因

tuomu45[使用道具]
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1
 

[求助]神经元不长是什么原因




神经元养三天了一直是圆形,不知道是什么原因
实验很急,各位大侠帮帮忙,
感激涕零
我的培养基是DMEM+10%FBS,因为要做药理,所以没加其他的添加剂
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zhezhe[使用道具]
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2
 

楼主,神经细胞的培养比其他组织细胞要难,原因在于:
1、除个别例子外,神经细胞不进行分裂,其在平皿中长出神经纤维作为突触,但不增加细胞数,因此若混入增殖体细胞,其大量增殖会使好不容易得到的神经细胞被挤掉。
2、神经细胞在脑中大多为细胞体,伸出的轴索纤维和复杂的树状突起在制取细胞时易受较大损伤;
3、神经细胞的生长多需特殊的生长因子或与名称相符的特殊物质,而且与其神经细胞的种类关系密切。
所以,如果楼主养的是原代神经细胞的话,如果确认在取材时细胞未受太大损伤,活力较好的话,培养基中需加入高浓度的葡萄糖(33mmol/L),以利于神经元的生长。维持培养液中还要添加15%FBS、10%HS、0.1%丁二胺、10mmol/L丙酮酸钠、5mg/L胰岛素等等。如果楼主什么都不加的话,养起来只怕是比较困难了。
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tuomu45[使用道具]
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我养的是胎鼠大脑皮层神经元细胞,除了DMEM+10%FBS,具体还需要加什么
谢谢指导
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mamamiya[使用道具]
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我做过胎鼠大脑皮层神经元细胞培养,用的培养基是GIBCO的neurobasal medium ,加 hepes,B27,Glutamine。专门养神经元的,长得蛮好。
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tuomu45[使用道具]
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我查FBS中也有转铁蛋白,胰岛素,和出生长激素等,为什么还要加别的东西
谢谢指教
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fsdd817[使用道具]
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FBS中的营养是不够的,
你可以加上B27,之外建议是用25mM的高糖
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tuomu45[使用道具]
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即使营养不够,也不能一点生长迹象也没有啊
请问楼上营养不够,一点不长是正常现象吗
还想请问大脑皮层神经元原代培养需要注意什么
养了2个月了,都不成功,实在很急,大家帮帮忙,先谢谢了
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summerxx[使用道具]
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8
 
建议用DMEM/F12加2% B-27,我原来养过2年多的胎鼠神经元,长得很好的。可以试试
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gemei0115[使用道具]
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建议用DMEM/F12加2%的B27;
你用的血清是哪里的?曾经因为血清的问题也耽误了很久,后来一直用JRH的还不错。祝好运。
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tuomu45[使用道具]
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感谢楼上的指导
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