[求助]请高手看看这是什么污染？

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标题:[求助]请高手看看这是什么污染？

HP007[使用道具]
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发表于 2012-5-18 12:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

CHOK1工程细胞株，贴壁培养。背景有小颗粒，严重时很多，会爆发。

附件

2012-5-18 12:23

67683318.snap.jpg (20.56 KB)

bananapeople[使用道具]
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发表于 2012-5-18 12:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

看上去象细胞碎片(可能是细胞凋亡体),图像不是很清楚,如果是细胞碎片,那么你所用的培养基(抱括各种培养条件)可能不适合这株细胞生长,应该及时换

HP007[使用道具]
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发表于 2012-5-18 12:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼上的，我用的培养基是加10%胎牛血清（PAA）的，也会不适应？
另外，chok1以前养过非常好养，现在细胞贴壁也有问题，不知如何解释？

utt0989[使用道具]
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发表于 2012-5-18 12:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼上的，我用的培养基是加10%胎牛血清（PAA）的，也会不适应？
另外，chok1以前养过非常好养，现在细胞贴壁也有问题，不知如何解释？

————————————————————————————————————————————————————————————————

细胞是否适应培养基并不是以血清的级别和含量来衡量的，任何细胞的最适生长条件都是有一定范围的，包括离子强度、pH值、二氧化碳浓度等等。高质量的血清和较高浓度对细胞生长当然有利，但是前提是基础培养基也要合适，比如自己配的培养液如果pH值把握不好，再好的血清，再高的浓度也不一定能使细胞生长的很好！以前养的好，只能说以前的培养条件比较适合这种细胞罗。实际上，从你的图片来看，细胞的状态相当不好了，看不到很多贴壁和活力很好的细胞

fsdd817[使用道具]
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发表于 2012-5-18 12:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问搂主：这些小颗粒是不是黑色的？在高倍镜下看是不是运动的，并且运动的很快?

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发表于 2012-5-18 12:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回楼上，显微镜下看是黑色的，圆形，椭圆形。运动的，布朗运动。较大的颗粒能看到3-5成团。低倍镜下像细沙铺在细胞间隙。

HP007[使用道具]
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发表于 2012-5-18 12:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1000rpm离心5min，上清培养24hr的图片，有大量的颗粒，显微镜下做布朗运动。

附件

2012-5-18 12:29

35545712.snap.jpg (34.61 KB)

abc816[使用道具]
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发表于 2012-5-18 12:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

和我的情况一样像小虫子一样常常聚集成团换液后改善一下在平皿或六孔板的时候更明显不影响细胞贴壁有腥酸味是真菌污染具体什么不太清楚
勤换液加双抗可能会纠正效果不会太好一般这种情况我就赶紧扔掉免得影响培养箱里其他细胞

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发表于 2012-5-18 12:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 abc816 于 2012-5-18 12:30 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
和我的情况一样像小虫子一样常常聚集成团换液后改善一下在平皿或六孔板的时候更明显不影响细胞贴壁有腥酸味是真菌污染具体什么不太清楚
勤换液加双抗可能会纠正效果不会太好一般这种情况我就赶紧扔掉 ...

楼上，为什么是真菌污染？

小鱼鱼[使用道具]
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发表于 2012-5-18 12:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不像是真菌污染~~！
感觉像是支原体污染~~！
以为要如果是真菌污染，会有像棉絮状的东西漂浮，有菌丝，很明显的~~！
我养的的是脑肿瘤细胞，有贴壁的，也有干细胞，感觉和我一段时间养的细胞状态很相似，问了我们实验室的博士，他认为像是支原体污染~~！！
这些小黑点在高倍镜下仔细看才清楚，就像楼上有位高手说的那样~~！

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