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标题:[求助]人胃癌组织原代培养求助

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发表于 2012-5-18 13:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]人胃癌组织原代培养求助




有人对人的胃癌组织进行原代培养，并且纯化培养成功的？？
有的话可否介绍一下方法啊！！谢谢！
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TAT[使用道具]
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发表于 2012-5-18 13:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们做原代，采用研磨法就可以了，贴壁后清洗换液也就可以了，不知道你对纯度有什么要求，肿瘤细胞还是很好养的，常规的1640培养基加点谷氨酰胺就可以了
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dotaaa[使用道具]
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发表于 2012-5-18 13:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
能否再讲具体一些啊？比如说研磨法的具体过程,所需要的具体仪器设备？
我现在是能养出一些细胞，但是总感觉细胞不够多，还有传代以后细胞存活的比较少，我在培养基里添加了0.5u/ml的胰岛素，不知道有没必要啊？？
望请高手指点？？
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发表于 2012-5-18 13:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我给你一篇文献:基层医学论坛2007;11(3):206-207 关于胃癌原代培养
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发表于 2012-5-18 13:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
兄弟
我做的是肝癌,也养了好久还是不行.
我用的是胶原酶法,消化后6孔板每孔10^6,老是见成纤维细胞长,癌细胞开始3天还有
后来就全一点都看不到了
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duoduo[使用道具]
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发表于 2012-5-18 13:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你有没有用过一种叫CAM的培养基,专门用来做原代的
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发表于 2012-5-18 13:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果不行 可以考虑先将组织块剪碎接种到裸鼠上，传代几代后在分离培养。
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发表于 2012-5-18 13:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢！楼上的几位
我现在采取的方法是，剪碎组织，后用200-250u/ml的 四型胶原酶，消化2h 后，吹匀，直接加到25cm 的培养瓶中，隔天再去观察，发觉有细胞长出来，但是换液后，就感觉细胞状态越来越差。
不知道，院里还有没高手指点一下，实验急。。
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dotaaa[使用道具]
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发表于 2012-5-18 13:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

基层医学论坛2007;11(3):206-207
这篇文章我看过，但是按照他的方法好像做不出来，细胞得率太少！
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dotaaa[使用道具]
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发表于 2012-5-18 13:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主可否将我的这个话题，归类到原代细胞培养专题啊？这样让更多的元代高手参与讨论？？大家共同进步啊？
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