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标题:[求助]帮我看看细胞被什么感染了

fei1226com[使用道具]
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[求助]帮我看看细胞被什么感染了




我虽然做了多年试验但是刚开始接触大批量的细胞培养。刚开始不久就发现了问题,这个细胞系是实验室之前的人留下的,但是原始保存的时候细胞就染菌了。我做了转染之后才发现。因为转染的东西非常珍贵,所以不能把细胞丢掉。只有请大家帮我看看这个到底是什么感染。

培养基没有明显得变黄,但是摇动时有云雾状的东西。我已经用了5%的Naficillin,但是感觉没有用。在丢掉细胞的时候觉得细胞闻起来有面包酵母的味道,但是又不敢肯定是不是真菌。所以请大家帮我鉴定一下,这到底是什么感染,我应该怎么处理?谢谢。


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2012-5-18 13:34
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greenbee[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 fei1226com 于 2012-5-18 13:34 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')



我虽然做了多年试验但是刚开始接触大批量的细胞培养。刚开始不久就发现了问题,这个细胞系是实验室之前的人留下的,但是原始保存的时候细胞就染菌了。我做了转染之后才发现。因为转染的东西非常珍贵,所以不能把细胞丢 ...

杆菌?
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tieshazhang[使用道具]
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真菌的菌丝一般呈亮的网状丝线,也有像树枝分岔状的,而且还会有花生样的聚集菌体,你这个看起来不像。长条状的像杆菌,但是好像个体也没有这么大啊,长度好像比细胞的直径还要长呢,也不像。估计是污染了虫子吧,具体什么虫子我也不知道,抱歉!
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bamboo16[使用道具]
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我已经分不清你这里面哪些是细胞哪些不是了

有面包酵母的味道,很可能存在酵母菌,视野中的黑色小圆球应该就是

长线状的东西实在想不出会是什么东西……会动吗?

试试两性霉素+青霉素+链霉素 cocktail,死马当活马医吧
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dongdongqiang[使用道具]
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有可能是丝状真菌
也有可能是假丝酵母(念珠菌)

如图

不管是什么,都需要用抗真菌的药物
两性霉素可以很好的杀死真菌,要是保险起见的话,做一个补加放线菌酮0.08 g/L的
当然,另外加入青霉素+链霉素双抗也可以,但我认为不是主要的因素,杀不了真菌,只能杀可能存在的细菌

祝好运!


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fei1226com[使用道具]
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继续求助

之前忘记说了,我的细胞是半悬浮的巨噬细胞。下面那些圆的应该也是细胞。长的是污染。高倍镜下会动的,但是不是整个游动,而是只是局部不规则摇动。如果不传代,两周培养基也不变色,但是细胞也不生长分裂。污染状况稍有增加。但是一旦传代(因为半悬浮,所以只是取旧培养基1ml加入到新培养基中),过夜之后杆状东西就会大爆发。

我已经用过了大剂量长时间的两性霉素,没有任何起色,仍旧在换液或者传代后大爆发。所用的一切试剂都是进口的。同时养的其他若干细胞系也没有出现任何问题。

求助啊。。。。。。。。。救命啊!
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这样严重的污染一看就只好丢弃,基本上很难有的救了。还不如重做节省些精力。
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xingyi08[使用道具]
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我觉得还是像真菌
建议还是丢弃吧,再引起整个实验室的污染就得不偿失了
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vvmmoy[使用道具]
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真菌,我也遇到过一次,估计没救了,再复苏支试试. 复苏的时候小心别有液体渗漏
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remenb[使用道具]
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菌长到这种情况,基本没救了,扔了吧!
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