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标题:[求助]如何取乳鼠心脏？定位？

ROSE李[使用道具]
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发表于 2012-5-21 13:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]如何取乳鼠心脏？定位？



如何取乳鼠心脏？定位？怎样避免取原代时污染？先谢谢各位群友的热心指导。
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yychen[使用道具]
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发表于 2012-5-21 13:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

操作好像很多人写过。
主要就是乳鼠固定消毒，用镊子撕开皮肤，然后更换器械，用眼科剪在胸廓左侧约心脏体表投影位置，水平切开肋骨，切口约1cm左右，挤出心脏。只要不剪开腹腔和肺。一般就不会污染。
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发表于 2012-5-21 13:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
操作好像很多人写过。
主要就是乳鼠固定消毒，用镊子撕开皮肤，然后更换器械，用眼科剪在胸廓左侧约心脏体表投影位置，水平切开肋骨，切口约1cm左右，挤出心脏。只要不剪开腹腔和肺。一般就不会污染。

————————————————————————————————————————————————————————

同意，也可剪成T字形状，用眼科镊一挤，心脏被挤出来后用眼科剪或眼科弯镊一夹就OK 啦，搜索本版有很多资源。
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ROSE李[使用道具]
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发表于 2012-5-21 13:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢各位热心帮助，我反复污染近10次，刚消化完镜下就看见小颗粒在不停抖动，但数天后培养基仍然清亮，不知什么污染，细菌培养皿不长细菌。我快疯了！
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园丁##[使用道具]
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发表于 2012-5-21 13:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
刚消化完镜下就看见小颗粒在不停抖动，但数天后培养基仍然清亮，不知什么污染，细菌培养皿不长细菌。我快疯了！

————————————————————————————————————————————————————

小颗粒是什么颜色的，怀疑是刚消化下来的细胞吧，就是那些亮亮的小圆点。不应该是污染也太快了吧。
PS，不长细菌是什么意思，笔误？
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windy+++[使用道具]
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发表于 2012-5-21 13:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

黑色，不是刚消化的细胞，在做布朗运动，只要它出现，细胞就不贴壁。不知那个环节污染，接种到血清琼脂糖培养基又没有菌落，培养液3天也不浑浊。我加新洁尔灭进去，它就不动了
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园丁##[使用道具]
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发表于 2012-5-21 13:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那你的细胞培养的怎样，是否也受的了影响，心肌细胞有搏动吗。你怎么确定是污染的，细胞不贴壁吗
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xingyi08[使用道具]
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发表于 2012-5-21 13:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

取元代第二天心肌细胞就死了，没有搏动，我每次贴壁去除成纤维细胞前，镜下看见那些小颗粒心都凉透了。培养基，血清换个便，还是一样。请大家指教啊
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园丁##[使用道具]
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发表于 2012-5-21 13:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以具体说一下你的操作过程吗，信息量有点少，具体一点的话大家说不定会帮助你的。
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ROSE李[使用道具]
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发表于 2012-5-21 13:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢各位群友的热心帮助，请继续指点迷津。我是在乳鼠第五肋间横切皮肤，事先浸泡酒精3min,老鼠已经死亡，有些拉便便，是否浸泡太久了。切完皮肤，碘伏消毒，换器械切开肌肉，再换剪刀剪心脏，不过因为停跳，不好取，有时也用镊子夹取。取出心脏在无菌培养皿洗涤，剪碎，加胶原酶消化。吸取上清入加血清培养基，收集所有消化液后离心，加培养基吹散贴壁，此时就已经发现黑色小颗粒在做布朗运动，如此失败重复近10次，我现在处于绝望停工阶段，请大家多多指教。
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