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标题:[求助]这是黑胶虫污染吗？？

xueyouzhang[使用道具]
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发表于 2012-5-21 16:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]这是黑胶虫污染吗？？




最近细胞接连的死去，找不出原因。每一次都是在原代培养后不久，第2、3代就出现死亡，找有经验人士看过说是黑胶虫污染，心里惶恐万分！因为鄙人面临毕业，如果真是黑胶虫污染可谓耗时伤财！！无奈原因还是得找，所以来这里，请高手帮忙一看！

为了便于大家帮我分析，先上以前养细胞养的好时的图片：

这是今年3月份养的原代细胞，从组织块爬出大约4、5天，可以看到细胞形态比较一致，核膜核仁明显，细胞状态好，整个视野非常干净！


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发表于 2012-5-21 16:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

接下来是爬出10天左右的，细胞状态也好，最重要是视野干净清亮！没有其余物质！胞质里也是很清亮的！


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 小中大

再看我现在培养的，刚从组织块里爬出来就觉得细胞的形态，大小均不大一致，而且培养皿底很脏，总是有很多小黑点！仔细看细胞质里也是布满了同样的小黑点！！可是，这种小黑点是不运动的，真的是黑胶虫污染吗？请大家帮我看看！


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发表于 2012-5-21 16:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
即使长满了融合了也是很多小黑点！！另外就是，凡是有这种小黑点存在，细胞状态都不好！即使是原代融合，也会发生凋亡！！


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发表于 2012-5-21 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这是传第2代，细胞已经失去了正常形态，胞体开始肿大，整个视野都布满了这种小黑点！！


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发表于 2012-5-21 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请帮助我，这到底是什么啊？
我的细胞现在总是养着养着就死了！
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发表于 2012-5-21 16:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
像是黑胶虫，我养的细胞系也有这种现象，但似乎不影响细胞生长。
而且血清不是关键，我用的是Gibco的新生牛血清，差不多是顶级的品牌了，一样有黑胶虫。
楼主可以在园子里在查查，有很多关于黑胶虫方面的帖子，或许有帮助。
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发表于 2012-5-21 16:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这哪里是什么黑胶虫啊，我看非常像是支原体污染
试试用环丙沙星 100微克每毫升的量处理24小时，再减至50微克每毫升养两个星期看看
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发表于 2012-5-21 16:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我前段时间培养细胞，如果继续用快用完的血清，也就是瓶底的血清都会污染！
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发表于 2012-5-21 16:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
观察了一下，发现刚换液差不多半小时就有这些黑色的小颗粒，一般是在细胞附近，怀疑是细胞本身释放出来的，找实验室老师看过说是因为细胞本身状态不好，所以释放除了很多颗粒，不是污染。。。即状态不好是因，释放黑色小颗粒是果，而不是因为小颗粒而导致状态不好，我都糊涂了，到底是不是污染呢？？因为我仔细观察过这些黑色的小颗粒是不动的，那么如果真的是细胞本身释放出来的，是什么原因造成这样呢？培养液PH值？？？还是渗透压？？
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