小中大[求助]我培养的神经元为什么没有突起啊?
各位老师：我最近在做新生鼠皮层神经元培养，已经培养第7天了，为什么突起还是不明显啊？我用的培养基是Neurobasal＋2%B27＋0.5mmol/L的L-谷氨酰胺＋100U/ml的青链霉素。具体培养过程如下：取出生一天的新生鼠4只，75％酒精消毒1－2分钟，断头取脑，体视显微镜下剥离脑膜，小心剥离皮层，至小烧杯中剪碎成1mm3左右大小的小块，加0.25％胰酶15ml，37度培养箱中消化15分钟，中途拿出吹打几次，用含10％胎牛血清的DMEM完全培养基终止消化，1500转离心5分钟，弃上清液，10ml的DMEM完全培养基清洗一次，轻轻吹打2－3次，再次离心（1500转离心5分钟），弃上清液，加入10mlNeurobasal＋2%B27＋0.5mmol/L的L-谷氨酰胺＋100U/ml的青链霉素的全培养基，轻轻吹打10－15次，200目滤网过滤，计数（因计数板当时不是太干净，计数不是太好），接种在培养瓶中（事先0.01％L-多聚赖氨酸包被过夜），3天后半量换液，以后每3天半换一次。培养24小时后，细胞呈圆形，折光性还可以，细胞密度也行。近几天，我看了下，细胞还是圆形，突起不明显，细胞状态也不少太好，个别有要飘起的迹象。以下，是我培养第7天皮层神经元细胞照片（400*）。请各位老师指导下啊，已经培养第7天了，为什么突起还是不明显啊？谢了啊！
