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标题:[求助]jurkat细胞用什么容器培养

8s5g[使用道具]
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发表于 2012-5-21 17:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]jurkat细胞用什么容器培养




给位战友
我以前只样过293细胞，用的是培养皿
现在要养jurkat细胞，它是悬浮的细胞，它的培养容器应该和贴壁的细胞不一样吧
谢谢
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summerxx[使用道具]
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发表于 2012-5-21 17:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

培养瓶和培养板都可以的,看你实验需要和需要的细胞数目了....
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glass[使用道具]
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发表于 2012-5-21 17:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

悬浮细胞最好养了，这个细胞以前养过，理论上，和293的培养没什么太大区别，以下几点希望能对你有所帮助：
1.1640，10%NBS,状态好的细胞很耗培养基，请注意换液；
2.细胞状态好的话，成大团生长，同时绝对不会贴壁，很多Jurket有变异，会成4倍体，如果出现贴壁，根据你的实验需要，三思之，流式PI单染下，以其他细胞做个参照，看看是不是4倍体再说。
3.细胞换液传代无需离心，反而离心使细胞团散了会影响状态，可以立起培养瓶，等细胞沉淀后洗掉上清，加入培养基就好，呵呵，简便吧。不过，计数使要拍散了，否则，不准。
4.至于容器吗，哈哈，用个东西养着就行，推荐你使用玻璃的T100培养瓶，一来便宜，而来可以大量繁殖，这个细胞体积很大，如果需要比较多的细胞数，小瓶子养太累了。想偷懒，可以，把瓶子立起来养也没什么问题，有多少培养基就可以长多少。
5.最后，不知道你想干吗了，我们都是要活化后的细胞做免疫学研究，如果需要刺激，用PHA不是ConA，记住了啊。
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8s5g[使用道具]
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发表于 2012-5-21 17:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢两位的解答
我是要提总RNA 细胞的量要很多

楼上说换液不离心 等沉淀了在吸上清
我有两个疑问
1 不会有细胞损失吗
2 等沉淀要多长时间
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dog002[使用道具]
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发表于 2012-5-21 17:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我做实验要用到Jurkat细胞，对它还不怎么了解，所以收藏了，谢谢
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dog002[使用道具]
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 小中大

实验要用jurkat细胞免疫小鼠，不知道有没有人做过呀？如果有做过的，不知道每次比例多少？
谢谢
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flower-201[使用道具]
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发表于 2012-5-21 17:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可以低俗离心去上清, 新鲜培养基重悬细胞沉淀,再培养的.....如果不离心,等细胞自然沉淀, 吸上清, 细胞数目会有损失, 沉淀至少5分钟以上吧....
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8s5g[使用道具]
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 小中大
悬浮细胞最好养了，这个细胞以前养过，理论上，和293的培养没什么太大区别

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悬浮的细胞不用震旦培养吗？如果不震旦的话细胞不都沉淀在底部，会不利于营养的吸收吧？
没养过悬浮的细胞，也没有查到悬浮细胞的培养方法，以上只是个人联系大肠杆菌培养的一点猜测，要是问的很低级，请别见笑
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发表于 2012-5-21 17:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Jurket细胞是人源的，免疫小鼠可能会有点麻烦，实验室一个博士做过，效果比较差，关于是否要震荡，至少我周围人养过得，肯定说，都是，不需要，把个大机器塞箱子里，太麻烦了。相反，入果震荡过了，细胞都给你摇散了，何必呢。
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-5-21 18:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
养细胞没有震荡养的,只有养细菌震荡养.
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