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标题:[求助]茜素红染液配制?

xyw5[使用道具]
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[求助]茜素红染液配制?



前面有位兄弟已经发过类似的帖子,但答案都不太完整,这里我想重新把这个问题提出来,希望大家帮助解决。
1)Tris-HCl是缓冲液,是先配PH值8.3的Tris-HCl,再加入茜素红,还是加入茜素红后再调节溶液PH至8.3?
2)茜素红的规格是怎么样的,要加多少量的茜素红哪?
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yychen[使用道具]
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茜素红S
中文名称: 茜素红S英文名称:alizarin red S; sodium alizarin sulfonate
CAS: 130-22-3分子式: C14H7NaO7•H2O分子量: 360.28中文别名: 9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐; 茜素红;(3) 茜素磺酸钠 ;茜素S ;酸性媒介茜素红;酸性媒介红S-80(Acid Mordnat Reds-80);C. I.媒介红3(C. I. Mordant Red 3)。

性质:橙黄色的针状体。溶于水,微溶于醇,不溶于氯仿和苯。1%水溶液pH2.15。由茜素经发烟硫酸磺化,然后转变为钠盐制得。茜素红能和许多金属离子生成稳定的红色络色物,在分析中常用作金属指示剂;光度法测定金属离子的显色剂;在分析中常用作金属指示剂;光度法测定金属离子的显色剂;酸碱指示剂,第一变色范围PH值3.7(黄)~5.2(紫),第二变色范围PH值10.1(紫)~12.0(浅黄);用于极谱法测定金属离子。

用途: 络合滴定指示剂和酸碱指示剂。

配制:将托盘天平上称取0.1g茜素磺酸钠定溶于100ml蒸馏水中转移入滴瓶中,贴标签备用。 或用茜素红粉加PBS溶解后,要注意调节PH值到7.2!过滤就可以了。0.1%的茜素红Tris-HCL(PH8.3), Tris的浓度做分子生物学一样的,用0.Imol/L的HCI或0 1%的NaOH调节。
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xyw5[使用道具]
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我用来做成骨细胞的茜素红染色,可以用PBS或蒸馏水溶解茜素红以后的染液进行染色嘛?还是得用Tris-HCL配制才行?
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xyw5[使用道具]
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我用来做成骨细胞的茜素红染色,可以用PBS或蒸馏水溶解茜素红以后的染液进行染色嘛?还是得用Tris-HCL配制才行?请大家帮忙回答,急啊!!
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BUK[使用道具]
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建议用Tris-HCL配制!理论上等渗溶液(PBS)都可以!
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xyw5[使用道具]
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6
 


QUOTE:
原帖由 BUK 于 2012-5-22 13:00 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

建议用Tris-HCL配制!理论上等渗溶液(PBS)都可以!

你看我这样配行不行:0.1g茜素红+PH8.3的Tris-HCL100ml,浓度0.1%
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eric930[使用道具]
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我的染不上去呢,颜色很浅哦,怎么回事?实验室以前留下的茜素红TRis-HCl,0.1%,我用D——Hanks 固定液固定细胞,用D-Hanks洗了几次,是不是中间的金属离子有影响
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owanaka[使用道具]
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8
 

我做的染色同样存在这个问题.
关于染色液的配置,我做了两种:
用双蒸水配置,PH 4.1,2MG/100ML
用Tris-Hcl (PH8.3),然后加入0.1g.
但是均不理想.在显微镜下可见钙化结节形成.不知道为什么?
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xyw5[使用道具]
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我用的是0.2%的茜素红染液,结果还不错
固定细胞应该用95%酒精,D——Hanks 液好像不能固定吧
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kuaizige[使用道具]
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我用的是2%茜素红溶液,用水稀释的,PH值:7.2.
37度温箱,染30分钟。
效果很好.
试过Tris-Hcl溶的,也试过PH:4.2的,还是水稀释的,PH值:7.2的效果好.
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