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标题:[求助]细胞换液后都飘了

小鱼鱼[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞换液后都飘了




用六孔板做转染，可是种了细胞24小时后贴壁挺好的，只要一换液再拿到镜下一看就飘了大半，贴的细胞液变圆了。。。。郁闷的，不知道为什么这样，很急！
自己分析了一下可能是细胞贴壁不牢，可是我养的是肿瘤细胞，之前在培养瓶里养从来没出现过这个问题。还是培养板操作有什么要注意的？
有哪位高手帮忙指点一下吧！！
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yhz1973[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我养的正常大鼠细胞也出现过这种情况，但是在培养瓶里，没找出原因，继续养了2天左右，部分又贴壁了，前辈们说是细胞状态太差所致。
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小鱼鱼[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
今天又换了一次液，动作轻了很多，飘得少了一点，但细胞都变圆了，看来还是不行。。。
要真是细胞状态太差，那这样得细胞还能做实验么？
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Ao7[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我以前种24孔板也是一换液就脱落，后来发现是培养板的问题，换了一块costar的就没问题了。不知道你的是不是这个原因。
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小鱼鱼[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我最近用得就是corning得板子，就是这样，郁闷死了，不知道是什么原因。。。
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u234[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也遇到此类问题

有没有什么方法呢。。。还有这样的细胞还可以继续实验么
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发表于 2012-5-22 13:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我觉得可能有几个原因：
如果培养板质量不好的话，会直接导致细胞贴壁不牢，换液之后容易飘。
换液的时候，尽量先使培养液复温，温度差别太大会使细胞产生应激变化，也是导致飘的一个原因。还有就是尽量不要全换液，如果实验原因需要全换液的时候，吸的时候要尽量小心，而且尽量缩短细胞暴露在空气中的时间，加液的时候贴着壁慢慢加。
我用的都是costar的板子，最近老师让重复使用，发现洗干净了重复用细胞贴壁也挺好，没有什么大的影响，原代的神经细胞也可以贴壁，呵呵，还不错，你可以试试。
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小鱼鱼[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的细胞可能是状态不太好，代数有点多了。。。
也用的costar的板子，楼上的重复用是怎么洗的呢？
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66小飞侠[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果是细胞贴壁能力有问题的话，建议用多聚赖氨酸铺板
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windy+++[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想问你一下，你换部分培养液的时候，是不是不应该拿液体清洗
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