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标题:[求助]细胞是污染了吗？

one[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞是污染了吗？

细胞冻存后再复苏很难养，用不上几天状态就不好了，慢慢出现很多渣子，也不长了，一点点死掉，怎么回事，该怎么办呢


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发表于 2012-5-22 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

细胞冻存后再复苏很难养，用不上几天状态就不好了，慢慢出现很多渣子，也不长了，一点点死掉，怎么回事，该怎么办呢


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发表于 2012-5-22 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你的细胞是PK-15吗，我们最近也有类似情况啊，不知怎么回事啊
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发表于 2012-5-22 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

她这个是BHK-21细胞。是培养基有问题。我出现过这个情况。测量渗透压和PH。然后就可以了。
继续努力啊。
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shenkunjie[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你复苏所用的培养基血清等等跟冻存时用的是一个条件吗 ？
如果条件都是一样的可能是冻存过程中出现了问题，再有就是复苏后DMSO取出不及时也会出现这种情况，影响渗透压
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发表于 2012-5-22 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

培养基我用的是10%血清的1640，还有复苏时，直接加到pbs里洗的，会有问题吗
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我佛慈悲[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我建议你复苏后等细胞贴壁达到70-80%时直接换液，要是BHK-21的话2-3小时后就差不多了，看看液氮罐里的液氮是不是还能浸没冻存管，是不是保存上有问题，还有复苏过程中是不是足够快，尽量在一分钟内完成解冻
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nn255[使用道具]
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发表于 2012-5-22 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得是染菌了，我也碰到过这样的问题，后来新配了培养基就好了
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发表于 2012-5-22 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我这几天也是碰到这个问题,一直复苏细胞都是不成功,开始是因为-80度冰箱出了问题,细胞保存的全死了,后来从别人那儿拿的也是刚复苏的很好,两三就混浊,应该是污染了!
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发表于 2012-5-22 13:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我养HK-2(正常人肾上皮细胞)出现过的问题是细胞状态跟图片上这种细胞状态挺像，细胞不饱，皱缩，我用了10%四季青的特级胎牛血清都不管用，但细胞长得不慢，也能传代，就是状态不好。后来有人建议用进口血清，我换了Hyclone的优级胎牛血清，还是一样的状态不好，再后来是补加谷氨酰胺后，细胞状态变好，细胞饱满起来。不知道这样能不能救你的细胞。
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