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从第2张图看,我认为是培养基里面的盐沉淀,类似情况最近我也遇到过几次,培养基底部有明显的不溶物,加入血清后,即使静止过夜,也会有不少不溶物悬浮在培养基中,很难沉下去。
所以如果遇到这种情况,培养基用前不要摇混,一般上面的培养基沉淀会少一些,用它培养细胞第一天可能会看到,之后这些不规则枝状漂浮物(有些粘在壁上不牢)就逐渐减少消失了。如果用到剩余的底部沉淀量会较大,对细胞生长会有很大抑制,建议丢剩余弃培养基。
有时候除了较大的不规则枝状沉淀,会有很多小点状沉淀,粘在培养瓶壁上,对细胞有更大的抑制,而且粘的比较牢,不太容易洗掉,要多洗几次。(培养基如果是这种情况就最好不要用了)
上面的情况还没有找到合适的办法消除已经产生的沉淀,可能是培养基PH值偏碱造成盐沉淀的,可以在配置是多加些hepes调酸一点,不要超过20mM,PH7.0-7.2, 过滤会使PH升高. 希望对你有帮助。