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标题:[求助]细胞是污染了吗?

缘yuan[使用道具]
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[求助]细胞是污染了吗?




大家帮我看看细胞,是染杂菌了吗?但是培养液不变混浊


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缘yuan[使用道具]
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再一张,是污染了酵母了吗?


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utt0989[使用道具]
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楼主,你的图不是很清楚,有没有倍数再高一点的?你可以先用4℃的PBS洗两遍,再换一下培养基(包括血清),如果不再出现这种东东了,那就不是污染了。
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缘yuan[使用道具]
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洗过,但没有换过血清,以前没有出现过这种情况,都是同一批血清,换液后还存在,刚开始有点像悬浮状的,但是过几天就变成像上面那张图的小细胞样,
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盼盼[使用道具]
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好像是污染了。第二个图很像酵母,显微镜下是否透亮的,有的有分叉?第一张怎么像霉菌,成团,絮状?
培养基不变浑,加上形态,不是细菌。
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mickeylin[使用道具]
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从第二张图看是霉菌污染,建议放弃,因为试过用两性霉素效果也不咋样,细胞也死了。
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缘yuan[使用道具]
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这是高倍镜下照的,今天清洗后看不到悬浮的东西了,是染菌了吗?清高手指点一下,谢谢


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缘yuan[使用道具]
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再一张?


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shenkunjie[使用道具]
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从第2张图看,我认为是培养基里面的盐沉淀,类似情况最近我也遇到过几次,培养基底部有明显的不溶物,加入血清后,即使静止过夜,也会有不少不溶物悬浮在培养基中,很难沉下去。

所以如果遇到这种情况,培养基用前不要摇混,一般上面的培养基沉淀会少一些,用它培养细胞第一天可能会看到,之后这些不规则枝状漂浮物(有些粘在壁上不牢)就逐渐减少消失了。如果用到剩余的底部沉淀量会较大,对细胞生长会有很大抑制,建议丢剩余弃培养基。

有时候除了较大的不规则枝状沉淀,会有很多小点状沉淀,粘在培养瓶壁上,对细胞有更大的抑制,而且粘的比较牢,不太容易洗掉,要多洗几次。(培养基如果是这种情况就最好不要用了)

上面的情况还没有找到合适的办法消除已经产生的沉淀,可能是培养基PH值偏碱造成盐沉淀的,可以在配置是多加些hepes调酸一点,不要超过20mM,PH7.0-7.2, 过滤会使PH升高. 希望对你有帮助。
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remenb[使用道具]
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应该是污染了,我也遇到过这样的问题,用PBS加高剂量的双抗都无法除掉,建议放弃。
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