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标题:[求助]流式结果分析

tudou85[使用道具]
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[求助]流式结果分析



请大家帮忙分析一下
Diploid: 100%
G1 :53.66%
G2/M : 0.00%
S : 46.34%
G2/ G1 :2.06
不知为什么没有DI值(Diploid是吗?)
我主要是看看细胞有没有异倍体。

还有一个结果,CV值>8%,可能是细胞本身的问题,还是做流式的问题呢?因为是让公司做的,如果是公司做的问题,好让他们重做!
麻烦了!谢谢
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glass[使用道具]
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呵呵,居然有公司收费做流式!
把图贴上来解释得才最准确。
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tudou85[使用道具]
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这是图,谢谢!


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glass[使用道具]
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因为我没有用过modfit,不确定A-H的设门是否正确,所以下面的话没有百分百的把握。
但是如果A-H设门是正确的,那么这样的DNA含量分布不用再分析了,因为具有明显的非周期特征,所以不管什么软件,不管谁来都没得救的。
建议重新制备样本,上机检测最好找有较丰富DNA分析经验的老师做,公司不一定靠得住的。
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glass[使用道具]
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你贴在上面的数据可以扔掉,没有任何价值的。
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tudou85[使用道具]
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好伤心!
上面的大侠能不能说明白一些,到底那里不对呢?怎样的数据才是正确的呢?能不能给点例子看一下呢?
谢谢!
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lagua123[使用道具]
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7
 

个人认为这种情况多发生于细胞不纯的情况,特别是组织直接分离的细胞,未经纯化,选取细胞群时选取了多种细胞,或者上样分析时没有设门去除细胞团和碎片的影响,导致结果无法分析。建议重做。
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tudou85[使用道具]
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我们最近在调试新购置的流式时,作DNA时也出现过这个样子的图,技术支持说有可能是细胞太大造成的,后来通过调节仪器的光斑解决了问题,正常的图应该是下面这样子的(网上搜到的)。

我觉得还是你的流式没有做好,正如楼上所说,可能细胞分析对象选取有问题,从你的图上看,它那个门设的太大了,基本上全部选取了,这样的话,有可能不能去除碎片和粘连的细胞,影响结果。没有出来比较满意的图形,那么后面分析也就没有意义了。

另外分析软件也是死板,我们用的是BD的,正常细胞分析一般选择周期模式,但是如果选择调亡检测的模式,它也能硬给你找出一个调亡峰。我想你用的软件应该也差不多。你也可以认为是S期为零。

还是作出满意的直方图后再分析吧。

刚接触流式,聊一点看法,仅供参考。


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glass[使用道具]
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我们最近在调试新购置的流式时,作DNA时也出现过这个样子的图,技术支持说有可能是细胞太大造成的,后来通过调节仪器的光斑解决了问题,正常的图应该是下面这样子的(网上搜到的)。

我觉得还是你的流式没有做好,正如楼上所说,可能细胞分析对象选取有问题,从你的图上看,它那个门设的太大了,基本上全部选取了,这样的话,有可能不能去除碎片和粘连的细胞,影响结果。没有出来比较满意的图形,那么后面分析也就没有意义了。

另外分析软件也是死板,我们用的是BD的,正常细胞分析一般选择周期模式,但是如果选择调亡检测的模式,它也能硬给你找出一个调亡峰。我想你用的软件应该也差不多。你也可以认为是S期为零。

还是作出满意的直方图后再分析吧。

刚接触流式,聊一点看法,仅供参考。

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很不幸,你很有可能真的说错了。
周期荧光分布特性和细胞大小无关,只要DNA含量均一性好,周期特征就很明显,分析起来就很准确。
当然了,我知道有一种机型就是BD的Aria因为是超小光斑,容易出现荧光饱和现象,但是应该和楼主的情况不一样的。所以你们的技术支持...
正常细胞分析不可能一般性选择周期模式,因为PI单染测定周期只是流式系统的其中一种应用,所占比例较低。凋亡和细胞周期也没有必然联系。
其实我不反对大家积极发言,但是考虑到发言有可能影响其他没有经验的同学的判断和操作,我还是建议你先不要急着对流式问题发表意见,可以先操作半年,积累了一定的经验并加深了该领域的理解后再发言不迟。
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tudou85[使用道具]
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谢谢,接受楼上建议。不过我也确实没有指导别人的意思,就算是讨论吧,也算是验证自己所学,我上面说的应该很谦虚或者说没有底气了吧

我也知道流式细胞用途极大,但是我说的是BD的配的一款分析软件的模式选择,是将dna分析结果导出后分析的,与流式已无关状态下操作的,是在分析有调亡峰与分析细胞周期是两种不同的模式而已,大概前面说模糊了,抱歉。那个软件确实有如此选择模式,我也不敢乱说的。

顺便请教一下,楼主的门设定是否有问题呢?几乎全选?
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