小中大我们最近在调试新购置的流式时,作DNA时也出现过这个样子的图,技术支持说有可能是细胞太大造成的,后来通过调节仪器的光斑解决了问题,正常的图应该是下面这样子的(网上搜到的)。
我觉得还是你的流式没有做好,正如楼上所说,可能细胞分析对象选取有问题,从你的图上看,它那个门设的太大了,基本上全部选取了,这样的话,有可能不能去除碎片和粘连的细胞,影响结果。没有出来比较满意的图形,那么后面分析也就没有意义了。
另外分析软件也是死板,我们用的是BD的,正常细胞分析一般选择周期模式,但是如果选择调亡检测的模式,它也能硬给你找出一个调亡峰。我想你用的软件应该也差不多。你也可以认为是S期为零。
还是作出满意的直方图后再分析吧。
刚接触流式,聊一点看法,仅供参考。
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很不幸,你很有可能真的说错了。
周期荧光分布特性和细胞大小无关,只要DNA含量均一性好,周期特征就很明显,分析起来就很准确。
当然了,我知道有一种机型就是BD的Aria因为是超小光斑,容易出现荧光饱和现象,但是应该和楼主的情况不一样的。所以你们的技术支持...
正常细胞分析不可能一般性选择周期模式,因为PI单染测定周期只是流式系统的其中一种应用,所占比例较低。凋亡和细胞周期也没有必然联系。
其实我不反对大家积极发言,但是考虑到发言有可能影响其他没有经验的同学的判断和操作,我还是建议你先不要急着对流式问题发表意见,可以先操作半年,积累了一定的经验并加深了该领域的理解后再发言不迟。