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标题:[未解决]HPLC的血样处理

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
yinge[使用道具]
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HPLC的血样处理

可乐定透皮释放的研究,打算用白兔做动物实验,拟用高效液相色谱测定其血样浓度,求助高人如何进行血样处理,如何去蛋白。不甚感激!

注:1 药物名称:
可乐定,clonidine,常用的中枢性强效降压药
2 拟定色谱条件:
流动相:乙腈-碳酸氢铵水溶液(pH 10.5);柱温:35℃;流速:0.2mL/min;进样量:10uL
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jin2009[使用道具]
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可以用乙腈沉淀蛋白,按1:1
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  • miracle   2009-5-7 15:04  专家分  +3   非常感谢您的帮助
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aasle[使用道具]
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血浆样品还是很容易处理的,这个药溶于乙腈,你可以加入乙腈(具有去蛋白功能)、震摇后高速离心,清液即可直接过膜上液相检测。
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  • miracle   2009-5-7 15:04  专家分  +3   谢谢您的热心支持
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chongwenmen[使用道具]
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简言之有如下几种:
1)加入与水相混溶的有机溶剂:如甲醇、乙腈
2)加入中性盐:如硫酸铵
3)加入强酸:如三氟乙酸
4)加入含锌盐或铜盐的沉淀剂:硫酸锌-氢氧化钠溶液
5)超滤法
6)酶水解法
建议楼主找书好好学习一下,不是一下子可以说清楚的。
楼主液相的流速蛮低的哈,pH蛮高的,记得用耐碱的柱子哟,要不硅胶会融的。祝楼主实验顺利!
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  • miracle   2009-5-8 11:51  专家分  +4   非常感谢您的详细回复 周末快乐 ...
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sexyJack[使用道具]
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200ul血样+200ul  甲醇+400ul乙腈 +内标等等 12000g离心10分钟,取上清,挥干。流动相复溶,进样检测。
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  • miracle   2009-5-10 09:31  专家分  +4   谢谢您的详细帮助 欢迎您常来百科网 ...
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