[求助]Raji细胞培养方法及经验

细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]Raji细胞培养方法及经验

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]Raji细胞培养方法及经验

rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态离线

发表于 2012-5-24 15:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

大家好，我刚买了Raji细胞株（淋巴瘤），对悬浮细胞培养方法不太了解，请问一般几天换一次液？昨天接到细胞就换液分瓶，今早发现细胞成团生长，我就有离心换液一次，将细胞吹打开了，这样做可以吗？贴壁细胞瓶壁贴满2/3以上就可以传代了，那悬浮细胞密到什么情况下可以分瓶传代呢？离心次数多了不好是吗？

ending[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 76092
精华 0
积分 771
帖子 1242
信誉分 100
可用分 6981
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态离线

发表于 2012-5-24 15:20 资料个人空间短消息加为好友

小中大

悬浮细胞传代是要轻轻吹打变成单个细胞悬液,我养的Raji细胞增长很快,第3天培养液就变黄了,细胞大部分成单个,小圆形生长,部分成集落,长满后你可以发现细胞密度较大.像你说的都成团了,应看培养液颜色,变黄就需要换液了,是的,不能离心太多次,用吸管轻轻吹打就可以了.

rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态离线

发表于 2012-5-24 15:21 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我拍了几张照片，请大家给指导一下。

附件

2012-5-24 15:21

36212859.jpg (10.92 KB)

rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态离线

发表于 2012-5-24 15:21 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这张和上一张都是未分瓶前的

附件

2012-5-24 15:21

23994458.jpg (8.44 KB)

rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态离线

发表于 2012-5-24 15:21 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这两张都是分过瓶之后的

附件

2012-5-24 15:21

68422508.jpg (14.71 KB)

66小飞侠[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75376
精华 0
积分 466
帖子 651
信誉分 100
可用分 4008
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态离线

发表于 2012-5-24 15:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼上群友说的很对呀，培养液开始变黄了，就吸取出4／5，作试验用或者冻存，或者丢掉，给留下的加入新培养液，轻轻混合就可以了，特别好长。

duoduo[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 74511
精华 0
积分 705
帖子 1009
信誉分 100
可用分 5926
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-11
状态离线

发表于 2012-5-24 15:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

Raji细胞很好养的！长得很快！假如说，你是用来做实验的话，可以少传代，悬浮细胞有了一定大的密度就能够长得很快，假如说，你只是维持它，等需要的时候再用时，那你可以传得稀一点，但是又不能太稀，就象你第三张图是差不多的！

rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态离线

发表于 2012-5-24 15:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢大家，我现在基本上两天就给它传一代了，看起来长的还挺快的。今天传代前计了下数，大约每毫升1.5x106吧，应该还可以吧。我想请教各位对这中细胞做过流式分析吗？我想加药干扰一下，不知道加药时侯选在细胞数大概在多少时为好，哪位有经验请指教

rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态离线

发表于 2012-5-24 15:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我自己看了第一次的照片，于目前相比确实有点稀，感谢大家指导