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标题:[求助]细胞死了!

cocacola[使用道具]
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[求助]细胞死了!



我的系膜细胞株复苏后养了10天后,传第一代后3天,铺满80%,换液后细胞突然都碎了,又养了3天后,细胞长了一些,间断2-3天换液;准备再次传代时,觉得不到80%多养了一天,大部分细胞都死了,成团,培养瓶中培养液ph值是6.4;接着又养了4天(中间隔2-3天换液),今天准备传代时,用pbs冲洗后出现很多白色点状物质(找了师姐、师兄看了,说是细胞分泌物和死细胞),低倍镜下看,细胞都脱壁了,死了大部分。这管细胞我养了1个月了,第一次传代后培养液中间断有白色点状物。我用了我的完全培养基和胰酶培养了别人的细胞没问题。请大家多多指导,会是什么原因!谢谢!
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vera+[使用道具]
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你每次都用的是同一批培养基吗?
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cocacola[使用道具]
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是呀,实验中所用的东西都没变。
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rxcc33[使用道具]
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是呀,实验中所用的东西都没变。
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lixi559[使用道具]
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要不然换换培养基试试看

换用一次性培养瓶,一次性的吸管,严防污染

有的细胞在玻璃瓶中生长也不好的,塑料瓶正电性比较好,对贴壁有利

另外PBS也可以换换看,实在不行直接用D-Hanks
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我也有累似的问题请求高手回答:
培养瓶中的肿瘤细胞很好,但是种96孔板后,细胞就死了(没有污染),对照组与加药组的细胞都死了,不知道为什么?谢谢!
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caihong[使用道具]
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我也有累似的问题请求高手回答:
培养瓶中的肿瘤细胞很好,但是种96孔板后,细胞就死了(没有污染),对照组与加药组的细胞都死了,不知道为什么?谢谢!

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强烈怀疑是96孔板有问题
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cocacola[使用道具]
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非常感谢大家,我的细胞培养没什么特别要求的条件,我又复苏了一管,准备再看看,换了低糖的培养基,前面我用的是高糖的。我的培养基配了1个月,细胞死之前我测了培养瓶中的ph值是6.4.
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orangecake[使用道具]
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6.4?偏酸了吧!

你培养基多久一换?该不会是变黄了才换吧?
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yhz1973[使用道具]
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10
 
强烈怀疑是96孔板有问题

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你好 谢谢你的建议 但是我的96孔板是新的 而且其他人用好像细胞没有出现问题
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