细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]细胞坏死的鉴定 （冰冻切片）

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]细胞坏死的鉴定 （冰冻切片）

二丫头466[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74070
精华 0
积分 266
帖子 272
信誉分 100
可用分 2101
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
1

发表于 2012-5-26 12:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞坏死的鉴定 （冰冻切片）



我想用免疫荧光技术来鉴定冰冻切片上神经元坏死（不是凋亡）的情况，请问，用哪种染料可以鉴定细胞坏死？用来做冰冻切片的！！有什么标志性marker吗？
有人说可以用Annexin-v-FITC和PI双染鉴定凋亡，那么怎么能鉴定坏死呢？
请大家指点！！
谢谢！
顶部
am10[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76183
精华 0
积分 676
帖子 971
信誉分 100
可用分 5735
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
2

发表于 2012-5-26 12:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 二丫头466 于 2012-5-26 12:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


我想用免疫荧光技术来鉴定冰冻切片上神经元坏死（不是凋亡）的情况，请问，用哪种染料可以鉴定细胞坏死？用来做冰冻切片的！！有什么标志性marker吗？
有人说可以用Annexin-v-FITC和PI双染鉴定凋亡，那么怎么能鉴定坏死呢？
请大家指点 ...

Annexin-v-FITC和PI双染:右上象限的代表晚期凋亡或者也可以说是继发性坏死的细胞,此法也可!
顶部
二丫头466[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74070
精华 0
积分 266
帖子 272
信誉分 100
可用分 2101
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
3

发表于 2012-5-26 12:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢版主！
我还有一个问题，如果我想染切片上的神经神经坏死，那么应该如何做呢？仅用PI能行吗？
顶部
am10[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76183
精华 0
积分 676
帖子 971
信誉分 100
可用分 5735
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
4

发表于 2012-5-26 12:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
AO/EB双染色荧光显微镜观察也可!

可将细胞分为4种类型：正常活细胞，早期凋亡细胞, 晚期凋亡细胞, 坏死细胞.

AO能够进入正常细胞膜的细胞中，与DNA结合显绿色/黄绿色荧光，与RNA结合显桔红色荧光。早期凋亡细胞的细胞膜正常，胞浆浓缩，核DNA浓缩致密，低倍镜下呈荧光亢进的圆珠状小体，高倍镜下可见不规则的块状荧光。晚期凋亡细胞胞膜通透性破坏被EB染成红色，核形态与早期凋亡细胞相似，或为浓染的红色碎片(核碎裂)或凋亡小体。而细胞坏死时，细胞膜的完整性早期即被破坏，线粒体明显肿胀，细胞体积明显增大，呈不均匀的橙红色荧光!
顶部
sunnyB[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77335
精华 0
积分 581
帖子 862
信誉分 100
可用分 5059
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
5

发表于 2012-5-26 12:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


发现了一个问题

有个帖子说，PI是不能透过活细胞膜，所以，对于切片，细胞膜本身就不是

完整的，所以，所有的细胞核都会染上的，是这样吗？

如果这样的话，那就是不能用PI来鉴定组织切片上坏死的细胞了，是吗？

还要请问各位战友，能用什么方法检测冰冻切片上坏死的细胞啊？
顶部
yueban-1147[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75776
精华 0
积分 692
帖子 1064
信誉分 100
可用分 6113
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-27
状态 离线
6

发表于 2012-5-26 12:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用胎盘蓝或PI.
顶部
二丫头466[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74070
精华 0
积分 266
帖子 272
信誉分 100
可用分 2101
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
7

发表于 2012-5-26 12:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我一直在查，可是还是查不到相关的
有没有做过类似实验的战友？
用tunel可以吗？是不是turnel也可以染上坏死的细胞
不行的话，我就凋亡和坏死一起检测
顶部
c86v[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77054
精华 0
积分 442
帖子 584
信誉分 100
可用分 3741
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态 离线
8

发表于 2012-5-26 12:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

常规HE染色应当可以吧
坏死细胞的细胞核不完整，溶解或干脆见不到核吧，但关键是切片中可能会丢失核，也不完全准确。
上述PI、AO/EB等均是针对培养的活细胞染色，应当对切片没有用吧？
顶部
milkdog[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79280
精华 0
积分 500
帖子 719
信誉分 100
可用分 4366
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-9
状态 离线
9

发表于 2012-5-26 12:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我开始就用的HE，效果不好
所以 才想用荧光试试
顶部
eric930[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79368
精华 0
积分 722
帖子 1061
信誉分 101
可用分 6148
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
10

发表于 2012-5-26 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

流式和免疫荧光无法完全准确得辨别坏死和凋亡，形态学改变是金标准，建议咨询一下病理科的老师
顶部