呵呵,我不是流式的试剂商,没有打算推销流式抗体的的打算,所以也不是要大家不做WB。我前面也说了,在胞内,可溶性蛋白方面,流式目前还有局限,而且流式抗体比较昂贵(直标抗体),但是应该来说发展前景还是很可观的。
确实是WB比较节约抗体,但是除了对大型实验室,多个人做同一个特定的项目,多数抗体都是用不完的,所以放着也是浪费了,因此在有选择的情况下,我倾向于流式,毕竟简单多了。
理论上是在多少细胞中加多少抗体,但实际上细胞均分的问题是没有必要的,因为抗体一般都是过饱和的,所以在细胞没有数量级的差别的情况下,并不会看到明显差别。如果说实验组细胞实在太多导致抗体不足的话多的话,容易产生的问题是背景荧光偏低,造成假阴性,而不是造成非特异性吸附。
另外抱怨一下,这么不给我加分啊,这可是我第一次在细胞技术栏目发帖啊,跟郁闷的是,在我的论坛中这个帖子居然还不在我的名下。