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标题:[求助]加MTT前要不要弃上清?

大白菜[使用道具]
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发表于 2012-5-29 12:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]加MTT前要不要弃上清?



请问加MTT前要不要弃上清呢?我前一段做的都是弃上清后又用PBS 清洗了一次才加入MTT的,但最近有人告诉我不要弃上清,也无需清洗,以免在加完MTT后的4h细胞形态发生改变?非常感谢
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caihong[使用道具]
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发表于 2012-5-29 12:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 大白菜 于 2012-5-29 12:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


请问加MTT前要不要弃上清呢?我前一段做的都是弃上清后又用PBS 清洗了一次才加入MTT的,但最近有人告诉我不要弃上清,也无需清洗,以免在加完MTT后的4h细胞形态发生改变?非常感谢 ...

不要弃上清,也无需清洗
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gogo[使用道具]
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发表于 2012-5-29 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不弃上清的话有可能你的药物也和MTT反应，影响结果。
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october7[使用道具]
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发表于 2012-5-29 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不去上清是绝对的。
加入MTT后需要反应至少4小时，去上清等于这段时间细胞离开培养基。细胞的死亡或凋亡不能判定是药物引起还是离开培养基（人为）引起。和MTT反应的药物很少，可查阅相关文献；如果你研究的药物有明确和MTT反应的报道或依据，那么去上清后也需要加入无药物培养基才能继续培养。但药物反应的时间就不能算上这4小时。
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大白菜[使用道具]
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发表于 2012-5-29 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我一直都是弃上清后加的 结果一直不理想:

真是非常感谢了
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ffooll[使用道具]
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发表于 2012-5-29 12:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不去上清是绝对的。
加入MTT后需要反应至少4小时，去上清等于这段时间细胞离开培养基。细胞的死亡或凋亡不能判定是药物引起还是离开培养基（人为）引起。和MTT反应的药物很少，可查阅相关文献；如果你研究的药物有明确和MTT反应的报道或依据，那么去上清后也需要加入无药物培养基才能继续培养。但药物反应的时间就不能算上这4小时。

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加入MTT后细胞是否还能继续生长?
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qqq111[使用道具]
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发表于 2012-5-29 12:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 ffooll 于 2012-5-29 12:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
不去上清是绝对的。
加入MTT后需要反应至少4小时，去上清等于这段时间细胞离开培养基。细胞的死亡或凋亡不能判定是药物引起还是离开培养基（人为）引起。和MTT反应的药物很少，可查阅相关文献；如果你研究的药物有明确和MTT反 ...

是继续生长的。只是MTT与酶反应需要一定时间，所以才需要提前4小时加入。
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发表于 2012-5-29 12:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 qqq111 于 2012-5-29 12:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


是继续生长的。只是MTT与酶反应需要一定时间，所以才需要提前4小时加入。

MTT与线粒体上琥珀酸脱氢酶反应后，不影响细胞活性？
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yhz1973[使用道具]
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发表于 2012-5-29 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

加上MTT4小时测和多于4小时测结果会有很大的差异吗？我有好几次都放着过了夜呢
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skytree[使用道具]
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发表于 2012-5-29 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

以下为个人意见，供参考：
1、不确定药物是否会与MTT反应，可只加两者做对照
2、4小时反应时间已经够了，无需过夜
3、无需用PBS清洗
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