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标题:[求助]流式细胞结果分析，以及图形探讨

biabiade[使用道具]
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发表于 2012-5-29 13:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]流式细胞结果分析，以及图形探讨


小弟用流式细胞仪测肿瘤细胞膜耐药蛋白，采用空白对照，结果如下求教高手：
１.对照组


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发表于 2012-5-29 13:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

实验组１


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 小中大

实验组２


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发表于 2012-5-29 13:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请教：１.实验组阳性率是否太高（不正常）
　　　２.实验组１和２是否有差别
　　　３.流式峰是否太过于集中，类似正态分布？？
　　　４.相同指标在不同处理组间的流式图形是否大体一致？？
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发表于 2012-5-29 13:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你这个结果没办法看啊，不论是对照组还是实验组，你怎么没有流式的阴性对照呢？

你把散点图有弄上来看看。
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发表于 2012-5-29 13:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1. 再次对技术员操作流式表示遗憾。正是因为这种管理办法，长期以来不知道有多少像楼主这样拿到没有任何解释的数据，最后可能变出种种不科学结论的情况！
2. 正是因为操作流式的技术员只是技术员而不是流式专家，理论基础差的缺陷暴露无遗，直接体现在对应用对象的理解基本为零，检测和分析方案僵化。
3. 批判完了说正事。楼主得到的分析方案是错误的，这里面看得出来有特异峰，只不过特异峰没有和背景峰良好分离而已，反映被检测靶点在特异反应群细胞上的表达和低反应细胞相比变化还不够大。由于特异峰分离不良，这个时候应该考虑加上FS或者SS做出PMT1-SS或者PMT1-FS双参数图，根据经验判断应该可以得到明显改善的两群分离效果，这个时候的特异群才谈得上正确的百分比。
4. 即使是没有特异峰，整体峰移也绝不应该使用比例固定门来分析，而是应该使用MFI来衡量靶点表达的变化程度。
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发表于 2012-5-29 13:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 gogo 于 2012-5-29 13:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
1. 再次对技术员操作流式表示遗憾。正是因为这种管理办法，长期以来不知道有多少像楼主这样拿到没有任何解释的数据，最后可能变出种种不科学结论的情况！
2. 正是因为操作流式的技术员只是技术员而不是流式专家，理论基础差 ...


你在哪里看到特异峰了，我甚至都没看出背景在哪里啊，难道说是右侧那个小峰是特异封，左侧大封是背景峰？如果用的是细胞系，我觉得可能性太小，整体封移的可能性比较大，此外，如果是细胞系，FS和SS似乎没有什么效果吧，大家的基本光学性质相当，能看出什么不同么？（请教中
）
第四点说的很对，整体峰移讨论百分比是很奇怪，建议用MFI或者KS曲线分析D-value来讨论.
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biabiade[使用道具]
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发表于 2012-5-29 13:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感谢以上几位大哥的指教，小弟用的是细胞系

散点图


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发表于 2012-5-29 13:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

问个可能忽略的问题：对照加了抗体了么？
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biabiade[使用道具]
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发表于 2012-5-29 13:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

空白对照未加抗体
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