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1. 第一天的细胞数不一样,这是不可避免的,不过一般可以计数后,每孔加同样的细胞,每组设3个以上复孔,可以计数或先坐第一天的MTT实验,但是这样与第N天的实验会存在着不同板子和操作的误差,不过为了尽可能减少这些误差,做时一定设空白组,可以是只加培养液不加细胞,处理跟对照组和实验组一样,最后再把对照组和实验组的OD值减去空白组的。
2. 标准化问题:有些文献上就给出具体的OD值,这样也是可以的,如果你想标准化,一般会把比如第一天或对照组当成1或100%,实验组的取值为跟第一天或对照组的平均OD值对比的相对值。
3. 统计方法: 你这样的实验设计一般用T检验就可以的,如果你的图就可以看出有明显的差异,也是可以的,有些杂志上也只是在方法上说明,图例里并没有说明,但严格上必须说明。