细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]离心转速大时间长对细胞有影响么？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 32  1/4 1234››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]离心转速大时间长对细胞有影响么？

lgm[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75381
精华 1
积分 374
帖子 383
信誉分 102
可用分 2781
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态 离线
1

发表于 2012-5-30 16:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]离心转速大时间长对细胞有影响么？



我养的帖壁细胞耐药株，细胞极其娇贵非常不好养，我复苏细胞采用1000r/min,离心10分钟，是不是有点时间长转速太大啊，细胞状态一直非常不好也找不出原因
顶部
yapuyapu[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76072
精华 3
积分 574
帖子 695
信誉分 106
可用分 4338
专家分 30
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
2

发表于 2012-5-30 16:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 lgm 的帖子

离心时间过长对娇嫩细胞是有影响的！
顶部
yapuyapu[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76072
精华 3
积分 574
帖子 695
信誉分 106
可用分 4338
专家分 30
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
3

发表于 2012-5-30 16:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

速度不大 时间过长 你可以试一下 不离心直接用培养基培养 第二天更换培养基
顶部
mamamiya[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72974
精华 0
积分 653
帖子 986
信誉分 100
可用分 5763
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
4

发表于 2012-5-30 16:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
速度还行?? 转子半径不祥,离心力未知...
时间有点长 ...5min试
顶部
pencil菲[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75646
精华 1
积分 410
帖子 476
信誉分 102
可用分 3191
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
5

发表于 2012-5-30 16:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般细胞离心都用800转5分钟就可以将大部分细胞离下来了，1000转稍微大了一点，10分钟时间可能长了一点，我建议先用800转离5分钟，如果细胞状态还不好就再缩短时间。
离心时间长了肯定会使细胞状态变差！
顶部
lgm[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75381
精华 1
积分 374
帖子 383
信誉分 102
可用分 2781
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态 离线
6

发表于 2012-5-30 16:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知道楼主用的离心机是什么型号的，我以前用过比较古老的大的离心机，800r/min 5min就可以，现在用的离心机比较小，一般都用1500r/min 5min。无论怎么样10min，时间是长了些
顶部
october7[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77254
精华 0
积分 448
帖子 616
信誉分 100
可用分 3856
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
7

发表于 2012-5-30 16:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不离心不可以吗？既然娇嫩，就最好不要离了，胰酶消化好后，直接加培养基培养，你不放心，可以等细胞基本贴壁后换液。
顶部
gemei0115[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76303
精华 0
积分 530
帖子 658
信誉分 101
可用分 4191
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-3
状态 离线
8

发表于 2012-5-30 16:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

800rpm 5min，如果娇贵的话可以加多点培养液和血清，就是在原10％FBS基础上外加1mlFBS，第二天换液，传代的时候也可以采取相同方法减少对细胞的损伤。
顶部
lgm[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75381
精华 1
积分 374
帖子 383
信誉分 102
可用分 2781
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态 离线
9

发表于 2012-5-30 16:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

昨天又试了一管复苏，还是那个贴壁细胞耐药株SGC7901/ADR,离心采用500r 5分钟，今天看还是不行啊，也试着提高把百分之十的FBS提高到百分之十五，细胞还是不行，换液看似帖壁可始终细胞呈黄色小圆点就是不长啊，怎么办？？急！
顶部
ququer787[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77499
精华 1
积分 469
帖子 553
信誉分 102
可用分 3661
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
10

发表于 2012-5-30 16:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 lgm 于 2012-5-30 16:47 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

昨天又试了一管复苏，还是那个贴壁细胞耐药株SGC7901/ADR,离心采用500r 5分钟，今天看还是不行啊，也试着提高把百分之十的FBS提高到百分之十五，细胞还是不行，换液看似帖壁可始终细胞呈黄色小圆点就是不长啊，怎么办？？急！ ...

那就不离心吧，直接培养了，贴壁后换液了
顶部
 32  1/4 1234››