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标题:[求助]请MTT和做抗肿瘤机理的高手留步

taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2012-6-7 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]请MTT和做抗肿瘤机理的高手留步



做的是小分子化合物对肿瘤细胞的影响。

多次ＭＴＴ重复实验得到稳定的实验结果是：此药物IC50在20.5ug/ml，　但在15ug/ml以下时显著促进细胞生长呀！！在10ug/ml时达到促进细胞生长最高值，为增长６７％。

我对此结果一筹莫展，平时看文献也少，对肿瘤细胞的了解也比较基础。

我该如何分析这个事情呢? MTT实验重复很多次，做了两个月了，汗。结果一直是这样的。

大家能讨论给点思路么？或者告诉我是否有次可能性存在，要查那些文献去继续也行啊。

谢谢大家，实验特别紧，我都不知道该不该关注此点。
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发表于 2012-6-7 12:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

能促进细胞生长很好啊! 有巨大的临床应用潜值，比如：神经退行性疾病中神经元丢失后的治疗，多种外科手术后的组织再生，等等。
其实，任何实验结果与预期的不一致甚至相反不是件坏事，而恰恰是件好事。因为预期结果是根据已有知识和经验推断出来的，可能你能想到，别人也能想到，因此可能创新价值并不大。而相反的结果，只要排除操作因素等人为影响，能基本准确反映事物的变化或发生，就有可能得到他人不曾想到的事物的变化规律。好多科学创新就是这么出现的。
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taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2012-6-7 12:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


我准备再做做流式和凋亡检测，验证一下这个结果。

你说的“神经退行性疾病中神经元丢失后的治疗，多种外科手术后的组织再生”都很有意义，但这个不都是应用于正常细胞么？
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taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2012-6-7 12:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

本来我准备做做正常细胞对照的，但貌似正常细胞很难养，呵呵，偷懒不养了

我在一年内要毕业，也真做不了什么东西，但如果这个实验真的很有意义的，我倒是愿意推迟毕业
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eric930[使用道具]
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发表于 2012-6-7 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也遇到过此类问题，曾做过茶多酚，在0-80ug/ml，是促进，再增大时才抑制细胞，也可以用细胞技术仪来验证结果。另外有些疑问：你的IC50是怎么得来的。
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taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2012-6-7 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

IC50是怎么得到的？？

请问楼上什么意思？我用一个小软件算出来的
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2012-6-7 12:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的意思是你的IC50是在既有促进也有抑制的情况下计算出来的？如果是，那样的结果准确吗？
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zhezhe[使用道具]
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发表于 2012-6-7 13:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

镜下见细胞都死亡了，为什么做MTT时其OD值却增高呢？
正常NK细胞加入MTT后活细胞内为什么不形成甲囋沉淀？
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utt0989[使用道具]
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发表于 2012-6-7 13:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

郑重提示：
检测药效必须做时间梯度，如6，12，24， 48， 96 小时。
本人很少见到或看到报道促进肿瘤细胞生长的药物。
很多化合物在短时间，如6－48小时内促进细胞生长，但在长时间内，如96小时，一般会抑制细胞生长。
如果您做的时间较短，请您再做长时间检测。

细胞污染细菌后，OD值会增大，有时会远远超过细胞的贡献。强烈建议您再做实验时将96孔板（加入MTT 2～小时后即可），在显微镜下观察，细菌会变为蓝紫色。
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831226[使用道具]
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发表于 2012-6-7 13:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我到是见过有一种中药浓度会促进肿瘤细胞生长，高浓度能抑制细胞！
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