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MTT重复性差，可以用CCK8,不过价钱可就高多了，我们用的是碧云天的，还不错，关于CCK8我大概从以下几方面给你说说吧
CCK-8和MTT的基本原理是基本相似的,都是被活细胞线粒体内的一些脱氢酶还原成有色的formazan,而死细胞则无此功能,活细胞越多,颜色越深,酶标仪下测的OD值就越高
CCK-8的优点:
1. MTT被线粒体内的一些脱氢还原酶还原成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解，而CCK-8产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤
2. CCK-8产生的formazan更容易溶解
3. CCK-8检测灵敏度更高，更加稳定
4. 酚红和血清对其测定无明显影响
5. 不必去上清，不必洗涤细胞，更加简便
6. 对细胞无明显毒性，加入显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到最佳测定时间
具体步骤：
1. 通常细胞增值试验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性试验每孔加入5000个细胞（具体每孔所用的细胞数目，需根据细胞的大小，细胞增值速度的快慢等因素决定）.按照试验需要，进行培养并给予0-10微升特定的药物刺激一定时间.
2. 每孔加入10微升CCK-8。如果起始的培养体积是200微升，则需要加入20微升CCK-8，其他情况以此类推，可以用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白孔对照。如果担心所使用的药物会干扰检测，需设置加了相应量细胞培养液、药物和CCK-8但没有加入细胞的孔做平星孔对照
3. 在细胞培养箱内继续孵育0.5，1，2，4小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较合适的一个时间点用于后续试验
4. 在450nm测定吸光度，如无450nm滤光片，可以使用420-480的滤光片。可以使用大于600的波长，例如650nm，作为参考波长进行双波长测定。
还有几个需要注意的问题：
1.使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定注意蒸发的问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃周围一圈的办法，改加PBS，水或者培养液，另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发
2. 检测依赖于脱氢催化的反应，如果待测体系中存在较多的还原剂，例如一些抗氧化剂会干扰检测，需要设法去除
3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定
我就说这些了，祝你实验顺利！
