[求助]mtt法，可不可以在加入DMSO后，保存几天在检测？

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标题:[求助]mtt法，可不可以在加入DMSO后，保存几天在检测？

kuohao17[使用道具]
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发表于 2012-6-9 17:51 资料个人空间短消息加为好友

小中大

大家好：
本人是个新手，做细胞培养要做MTT，我计划1小时，4小时，12小时，24小时，96小时，168小时，240小时，312小时各取出一孔细胞做mtt,观察粘附数量，和增值的变化，我要是每次取出细胞就做，相当麻烦，因为酶联免疫检测仪器在别的科室，特别是前面几组，人家不上班。
我能不能，在加入dmso后，晶状物溶解后，给它放在冰箱了，等10天后，结果全部出来，在放在一起测量。
谢谢，请大家多提宝贵意见！

爱老虎游tt[使用道具]
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发表于 2012-6-9 17:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可以的，我试过，1周内没问题。10天没试过，因该没问题的

kuohao17[使用道具]
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发表于 2012-6-9 17:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是不是不加DMSO溶解它，放的更久些？我查资料mtt和细胞反应形成一种难溶的物质，我过十二小时在溶解它，这种方法可行吗？

viviwang1987[使用道具]
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发表于 2012-6-9 17:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你可以按你的时间点加MTT，过十二小时（即人家上班时）溶解，这方法我试过，没有什么影响的。
细胞培养指南上说加MTT后四小时即检测，我个人理解是兰色结晶至少四小时才能形成，不能短于这个时间。至于长一些，兰色结晶已经形成，我觉得问题不大。
如果你还是不放心的话，你可以做一个检测，即加MTT十二小时和四小时后作个对照。
好运！

sunnyB[使用道具]
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发表于 2012-6-9 17:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不可以这么做的，加DMSO后，时间延长，颜色会加深。可以参考园中的一个帖子：
cuturl('http://www.dxy.cn/portal/article/4/20/189/1454_3.html')
从我自己的经验来看，也的确是这样。

hyuu[使用道具]
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发表于 2012-6-9 17:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

个人认为时间不要超过太久,否则OD值有较大变化,我曾测过脾细胞,加入dmso一天之后较正常测量的OD值变化较大

whitesheep[使用道具]
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