细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]原代培养第11天出现的污染,是否与取材有关?

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[求助]原代培养第11天出现的污染,是否与取材有关?

fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
1
 

[求助]原代培养第11天出现的污染,是否与取材有关?



原代培养(组织块法),第1~8天,培养液清亮,细胞正常萌出生长,3rd、6th、8th天半换液,8~11天未处理。
第12天出现,培养液混浊,组织块似“融化状”;
镜下:大量悬浮“晶体”样物质,部分聚集成团,整个视野(不同层次)都有,小“晶体”布朗运动。
请问大侠,是细菌污染还是组织崩解?若是污染,可能的来源?
顶部
fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
2
 

组织块似“融化状”


查看积分策略说明
附件
2012-6-16 14:49
33789682.snap.jpg (29.49 KB)
 
顶部
fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
3
 

培养液混浊


查看积分策略说明
附件
2012-6-16 14:49
31345382.snap.jpg (18.19 KB)
 
顶部
fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
4
 

4×10大量悬浮“晶体”样物质,部分聚集成团,整个视野(不同层次)都有


查看积分策略说明
附件
2012-6-16 14:49
22249695.snap.jpg (34.55 KB)
 
顶部
fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
5
 

10×10 大量悬浮“晶体”样物质,部分聚集成团,整个视野(不同层次)都有,小“晶体”布朗运动.


查看积分策略说明
附件
2012-6-16 14:49
36954940.snap.jpg (43.45 KB)
 
顶部
fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
6
 

40×10 大量悬浮“晶体”样物质,部分聚集成团,整个视野(不同层次)都有,小“晶体”布朗运动.


查看积分策略说明
附件
2012-6-16 14:52
11623896.snap.jpg (48.55 KB)
 
顶部
utt0989[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78340
精华 1
积分 660
帖子 975
信誉分 102
可用分 5663
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-28
状态 离线
7
 

绝对是
顶部
yes4[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77377
精华 0
积分 764
帖子 1145
信誉分 101
可用分 6575
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
8
 

我看主要是组织块的问题!
顶部
fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
9
 

补充说明:
皮肤成纤维细胞原代培养
每次换一半或2/3的培养基
8th换液前检查,细胞状态正常,未注意到污染征象,9~11天未处理,未观察。
培养液用了近一个月,2周填glutamide。
培养基做了污染检测:
25th/July 原代培养基,无FBS培养基(取材过程,营养标本用)分别加入FB 已传代的瓶子里,原瓶无污染。5滴/瓶
26/july 观察,2瓶培养基清亮,加原代培养基未出现明显变化;加无FBS培养基的瓶子,有晶体状物质不多,部分成团,未出现上述图片中的混浊。故,继续观察
28/july 继续观察:两瓶培养基清亮,加无fbs的瓶子,仍晶体状物质不多,未出现上述图片中的混浊。

注:
1.2瓶细胞是准备弃用的,污染检测前已经爬满瓶底;
2.如果污染来源是“无FBS培养基”,为什么第12天才出现污染?照此类推,是否也须观察12天,污染检测的瓶子才会出现类似情况?
3.会不会是DMED培养基里的成分析出,形成的晶体状物质?这瓶培养液是从-20‘C拿出来的。
4.会是操作的问题吗?(传代培养的细胞,我还很少出现污染)

请大侠指教!
顶部
fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
10
 
我看主要是组织块的问题!

——————————————————————————————————————————————————————

请教:
如果是组织块的问题,为什么第12天才观察到污染?
有文章说:培养液的污染检查,在有细胞的瓶子里48小时能观察到细菌污染;半周能观察到真菌污染。
请教,如何解释?
顶部