小中大我查过以前的帖子,也看了一些相关的文献:我支持LZ的看法,线粒体膜电位降低,荧光强度是减弱.整理一下,和大家共同讨论:
所谓荧光染色,就是染色试剂与目标物质结合而发出荧光进行检测!
线粒体为双膜结构,外膜通透性大于内膜的通透性,内膜中存在的一些载体蛋白与通道可以运输某些物质,质子泵存在于内膜,它将基质内质子泵入外室,从而形成横跨线粒体内膜的线粒体跨膜电位, 跨膜电位内负外正,跨膜电位的存在使一些正电荷荧光燃料rhodamine 123、DiOC6(3)、J C-1 、CMX-ROS 可结合到线粒体基质.
Rh 123是一种细胞通透性的、阳离子的荧光探针,容易被有活性的线粒体摄取,没有细胞毒性。Rh123透过细胞膜在活细胞的线粒体内聚集而发出绿色荧光.
当细胞凋亡时,线粒体跨膜电位下降(已经证实的,线粒体跨膜电位的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转)、线粒体膜的转运能力下降,电负性降低,细胞线粒体积聚Rh123的能力也下降,荧光强度降低.
还有前辈做过凋亡分析,也转述过来:在流式细胞仪上用碘化丙啶(即PI,红色荧光染料)和Rh 123染色来检测。以Rh123荧光强度为横坐标(绿色荧光),以PI荧光强度为纵坐标(红色荧光)作直方图,可见:绿色荧光:正常细胞>坏死>凋亡细胞;红色荧光:坏死细胞>正常细胞=凋亡细胞。(因为只要细胞膜完整,就可拒染PI,凋亡细胞早期胞膜是完整的,因此像正常细胞一样亦拒染PI。)
因此,我认为应该是和LZ一样的结论.