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标题:[求助]1640变紫如何挽救?

KGZ564[使用道具]
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[求助]1640变紫如何挽救?

我的1640在4℃冰箱放置了一个月左右,现在变的很紫了,还能使用吗?
以前看过一帖说配培养液的时候如果颜色偏紫就把它放在培养箱中放一晚颜色就可以变回来,是这样的吗?
现在的这样子还能用吗?加多少血清可调回PH值?


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可用,用盐酸调到橙红色,用时补加谷胺酰氨。
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1640变紫说明PH偏碱,建议最好重新凋一下PH
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Ao7[使用道具]
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1.你的培养基瓶子应该加橡皮塞不能用布包裹保存,4度保存;另外后面图片,培养基颜色发浑,是不是已有污染,取少量滴于载玻片,镜检。
2.一般偏紫色说明PH偏碱,可以用盐酸调整PH值,然后再滤过。
3.放到培养箱主要是说放到CO2培养箱,部分co2可以进去,中和碱,使之偏酸。存在几个问题,时间上不好把握,有时会过头,也就是偏酸了,颜色泛黄;还有就是有污染可能;也许还会影响培养基的成分。
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提出几个建议:
一:如果你的培养基瓶口的裹布里没有橡胶塞,那你的培养基保存方式是不正确的,单纯的布裹口达不到密封的要求,严格来讲,在盖上橡胶塞后再用封口膜封上。
二:再者,你没遵循培养基的使用原则,长期保存-20度,短期使用4度,每瓶打开使用应尽量在少数次数短时间内用完,所以要用合适的瓶子,所盛的培养基量在3-5次用完,4度长时间保存使用易污染,PH值易改变。
三:楼上的说得不错,放到培养箱里,这样既改变PH值,又能检验有无污染,但密封太严CO2进不去,不密封感染的几率增大。
四:第二张图片本人认为不是污染,是瓶壁上的水雾所致。
五:建议再次配制培养基时或者在别人配制培养基时同时调PH值,过滤。如果果急用的话,就单独调PH值,过滤。
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1.你的培养基瓶子应该加橡皮塞不能用布包裹保存,4度保存;另外后面图片,培养基颜色发浑,是不是已有污染,取少量滴于载玻片,镜检。
2.一般偏紫色说明PH偏碱,可以用盐酸调整PH值,然后再滤过。
3.放到培养箱主要是说放到CO2培养箱,部分co2可以进去,中和碱,使之偏酸。存在几个问题,时间上不好把握,有时会过头,也就是偏酸了,颜色泛黄;还有就是有污染可能;也许还会影响培养基的成分。

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不是发浑,而是刚从4℃冰箱拿出来,有层薄雾,相机分辨率不够造成的!
谢谢指教
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KGZ564[使用道具]
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提出几个建议:
一:如果你的培养基瓶口的裹布里没有橡胶塞,那你的培养基保存方式是不正确的,单纯的布裹口达不到密封的要求,严格来讲,在盖上橡胶塞后再用封口膜封上。
二:再者,你没遵循培养基的使用原则,长期保存-20度,短期使用4度,每瓶打开使用应尽量在少数次数短时间内用完,所以要用合适的瓶子,所盛的培养基量在3-5次用完,4度长时间保存使用易污染,PH值易改变。
三:楼上的说得不错,放到培养箱里,这样既改变PH值,又能检验有无污染,但密封太严CO2进不去,不密封感染的几率增大。
四:第二张图片本人认为不是污染,是瓶壁上的水雾所致。
五:建议再次配制培养基时或者在别人配制培养基时同时调PH值,过滤。如果果急用的话,就单独调PH值,过滤。

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分析的很好,也很对。关于“培养基瓶口的裹布里没有橡胶塞”这个我还是知道的:)胶塞加封口膜。因为我的实验一做就是4、5个小时,所以培养基暴露在外的时间可能还是比较长的,看来得100ML的来分装才行了。
今天只用胶塞塞住,包裹,放培养箱过夜,明天来看效果。
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我觉得没什么大问题,加到培养瓶里,放到培养箱后不久就会变红了。
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yhz1973[使用道具]
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保证无菌,HEPERS调一下PH,应该是原培养液的PH缓冲能力不足所致。
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kuaizige[使用道具]
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可以在培养基里加入HEPES,这样的培养基具有较强的缓冲能力,PH值比较稳定。注意无菌操作。
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