细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]关于淋巴细胞的体外培养问题

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 15  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[求助]关于淋巴细胞的体外培养问题

qumm1985[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76908
精华 1
积分 475
帖子 546
信誉分 102
可用分 3616
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-10
状态 离线
1

发表于 2012-6-24 13:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]关于淋巴细胞的体外培养问题


关于淋巴细胞的体外培养问题
我希望体外扩增CIK细胞，我首先分离外周血单个核细胞，并用粘附法去除了单核细胞，剩下了T和B淋巴细胞，再用相应细胞因子刺激产生CIK细胞。由于我没有接触过淋巴细胞的培养，不清楚我分的对不对，我上传的照片是分离后12小时的400倍照片，请大家帮我看看，有没有哪种染色方法可以进一步鉴定细胞类型。谢谢

论坛里有没有做CIK细胞的，能交流下吗？


查看积分策略说明
附件
2012-6-24 13:32
31652745.snap.jpg (18 KB)
 
顶部
qumm1985[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76908
精华 1
积分 475
帖子 546
信誉分 102
可用分 3616
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-10
状态 离线
2

发表于 2012-6-24 13:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

另一张图：


查看积分策略说明
附件
2012-6-24 13:32
33275117.snap.jpg (17.15 KB)
 
顶部
qumm1985[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76908
精华 1
积分 475
帖子 546
信誉分 102
可用分 3616
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-10
状态 离线
3

发表于 2012-6-24 13:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这张是我刺激培养8天后的照片，帮我看看那个细胞团是什么？是单克隆吗？


查看积分策略说明
附件
2012-6-24 13:33
98005163.snap.jpg (50.27 KB)
 
顶部
caihong[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73197
精华 1
积分 795
帖子 1206
信誉分 102
可用分 6856
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
4

发表于 2012-6-24 13:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
细胞团状为淋巴细胞增殖的集落。
顶部
caihong[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73197
精华 1
积分 795
帖子 1206
信誉分 102
可用分 6856
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
5

发表于 2012-6-24 13:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼主第一张图片是除去单核细胞后的淋巴细胞（包括T/B淋巴细胞，其中主要是T细胞），在图的背景贴壁生长的不规则细胞应该为巨噬细胞或成纤维细胞。
顶部
qumm1985[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76908
精华 1
积分 475
帖子 546
信誉分 102
可用分 3616
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-10
状态 离线
6

发表于 2012-6-24 13:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢各位的指教。
但是我的细胞总数一直都是下降的，第6天到第8天开始稳定了，但是细胞数量不到原来的一半，这正常吗？我开始10ml全血分了8×10（6）细胞，现在细胞数量只有3×10（6）。
顶部
qumm1985[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76908
精华 1
积分 475
帖子 546
信誉分 102
可用分 3616
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-10
状态 离线
7

发表于 2012-6-24 13:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问我第一张图中，大点的细胞是T细胞还是小的细胞是T细胞？ 我的细胞还正常吗？谢谢
顶部
baidukk[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77444
精华 0
积分 803
帖子 1226
信誉分 100
可用分 7048
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
8

发表于 2012-6-24 13:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

前面两张应该是贴壁的吧,是刚刚分离出来的吗,还有你用的是进口的还是国外的淋巴细胞分离液,我感觉背景还是比较干净.是T还是B肉眼应该不好说的哦,B淋巴细胞也要部分贴壁,还有你先用贴避法分离单核,分离后细胞都可以达到多少?你分离的应该都是T与B细胞,有极少数的红细胞,比我的少的多.你要通过什么染色想鉴别T和B好象不可以哦,我是想通过流失CD来鉴别.但是我的细胞用细胞因子刺激后一直不增殖,我养外周血的B淋巴细胞.但是我的细胞总数一直都是下降的，第6天到第8天开始稳定了，但是细胞数量不到原来的一般，这正常吗？你用什么刺激 增长?是刺激那种细胞增长,如果只是刺激一种,那么其他的应该会死掉,前面几天(5-9天)细胞数目回大量减少.细胞团状为淋巴细胞增殖的集落。这点我比较赞同.因为我分离后也有,应该是淋巴细胞母细胞化并聚集.其它的应是内皮细胞和细胞碎片之类,应该无关紧要.希望私下多交流!
顶部
tieshazhang[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74105
精华 0
积分 338
帖子 436
信誉分 100
可用分 2916
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-5
状态 离线
9

发表于 2012-6-24 13:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1.我想养的是T淋巴细胞，细胞数量减少是正常的吗？
2.你们多长时间晃动一次细胞，我是24小时一次会少吗？
顶部
greenbee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79370
精华 0
积分 710
帖子 1119
信誉分 100
可用分 6368
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
10

发表于 2012-6-24 13:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是不能判断的
顶部
 15  1/2 12››