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标题:[求助]抗性筛选

superboy[使用道具]
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发表于 2012-6-24 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]抗性筛选


看了好多文章，都是用G418来筛选转染后的细胞，但所用载体都为新霉素抗性，我选的是卡钠抗性的载体，可以用卡钠来筛选稳定的细胞吗？请指教！谢谢
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tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-6-24 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

兄弟，G418、Zerocin、潮霉素为真核抗生素，氨卞、卡那霉素等为原核抗生素，一般情况下做原核表达的载体上只有原核抗生素抗性基因，而在真核表达载体上有的只有真核抗生素抗性基因，有的载体原核真核抗性基因都有，做真核细胞的稳定株的筛选只能用真核抗生素，你把两个抗生素搞混了。
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junjie05[使用道具]
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 小中大

奥原来是这样，小弟是研一的刚开始做实验，那只能换载体了？如果用原来载体是不是筛选不出来？嘿嘿……知识很浅敬请指教
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u234[使用道具]
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发表于 2012-6-24 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

奥原来是这样，小弟是研一的刚开始做实验，那只能换载体了？如果用原来载体是不是筛选不出来？嘿嘿……知识很浅敬请指教
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vera+[使用道具]
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发表于 2012-6-24 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那要看你原来的载体在真核中到底是什么抗性的啊，你要先搞清楚这个。
细胞人说的没错。
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jujuba[使用道具]
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发表于 2012-6-24 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的在提示卡钠抗性的，PVAX1
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831226[使用道具]
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发表于 2012-6-24 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

卡那抗性是指在原核中的，要搞清楚在真核中的是什么抗性。好好看看说明书。
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superboy[使用道具]
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发表于 2012-6-24 16:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我看了说明书上确实是卡钠抗性，现在我都糊涂了哈哈
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superboy[使用道具]
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 小中大

我这个载体本身就是真核表达载体啊？
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gemei0115[使用道具]
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发表于 2012-6-24 16:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

卡那抗性是你的载体其中的一个特性，它肯定还有真核抗性的，你再仔细看看说明书
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