小中大[求助]免疫组化和免疫细胞化学
查了一下‘免疫组化和免疫细胞化学’
有这些基本观点:
1.免疫组化指的是针对组织切片的免疫化学染色,根据切片的不同一般可分为冰冻切片和石蜡切片,两种切片的免疫染色实验过程大体相同但是冰冻切片一般不需要抗原修复即可,但是实验过程容易掉片子。
免疫细胞化学是针对细胞的免疫染色,根据细胞是否贴壁生长,可以采用不同的方法制片,如细胞爬片(贴壁生长细胞),或者甩片(悬浮细胞)。
2.一抗我们一般直接用的是公司的工作液或者用PBS稀释一抗,但是有的公司有专门的抗体稀释液
3.抗体浓度的摸索本人一般是按照抗体说明书,先采用一个最高浓度和一个最低浓度,看看染色效果后再决定如何改进。
细胞免疫化学,是用细胞爬片做的,一抗一般都可以用PBS稀释,IH的一抗浓度一般比IC高一点
我的疑问:
如果做免疫组化检测细胞表面CD分子,很多试剂似乎适用于免疫组化IH和免疫细胞化学IC,有的只能用于IH,没有标明用于IC,不知该如何选择?如果选用同种试剂,方法有何不同?直接问代理商又怕被误导。
不知各位有何体会?
[ 本帖最后由 rxcc33 于 2012-6-28 10:42 编辑 ]