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无污染无细胞培养基就不会变黄，培养基变黄的原因是溶液ph变化的结果，一般培养基变酸时变为黄色，如果此时在倒置显微镜下观察不到细胞，则很可能是被污染了，不知从红变黄的时间有多长？
如果是被污染了，可以试试一下措施避免污染：
1、严格无菌操作，戴口罩，帽子，操作前用紫外灯照射台面半小时，酒精棉球擦拭超净台桌面；
2、原代培养可加一定量的双抗；
3、移液时一定不要打湿培养瓶口及装培养液的瓶口，否则要耐心将其用酒精灯烤干（塑料瓶小心烤干）
总之，原代培养污染的可能性比养细胞系大些，但只要严格要求，认真做好每一步，还是完全可以避免的，楼主可以回忆一下自己的操作，可能就会发现问题所在，希望我们互相讨论，共同进步。
