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标题:[求助]细胞传几代后生长缓慢是啥原因

greenbee[使用道具]
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发表于 2012-7-10 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]细胞传几代后生长缓慢是啥原因



我养的是胃癌BGC823，每次复苏的细胞在传过3-4代后，经常生长很缓慢，往往好几天也不能长到理想的密度，细胞形状也变得难看了，说起来也就是状态不好吧。请教过别人，说是传代时太稀会对细胞生长有影响，我现在传的时候都比较注意这个问题，但还是不行，不知道为什么。请大伙给指点一下啦！
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zranqi_1[使用道具]
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发表于 2012-7-10 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我现在养的细胞（和你的细胞不是一样的细胞），也出现这种问题，刚开始生长的很好，形态也很好，生长的也很快。但是，经过一段时间，就生长的很慢，形态很差。不知道是什么原因？我考虑，可能是消化时出现问题，胰酶浓度不合适，但是现在还不能确定！也没有查到相关的资料！
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HP007[使用道具]
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发表于 2012-7-10 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

消化时胰酶作用时间长或者吹打用力都会造成细胞膜的损伤，进而影响细胞的生长。
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greenbee[使用道具]
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发表于 2012-7-10 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我做过一段时间，消化大约5分钟，并在镜下观察消化程度然后吹打，吹打也挺小心的。现在，基本上都是根据经验消化5分钟，也就不再看了。
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二丫头466[使用道具]
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发表于 2012-7-10 16:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

新买的细胞吧 ，开始好好的，慢慢就不行了

我以前养过一种细胞也是复苏后3-4代就不行了，慢慢飘飘飘了，大家说是支原体污染，后来也没在用，也不知怎么回事

我一般就消化几十秒，可不能消化过啊，那样很可能OVer
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发表于 2012-7-10 16:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我养的乳腺癌细胞也出现了这种现象，传代之前还好，每次传代之后要好长一段时间细胞都恢复的不怎么样。我每次消化的时间也不长的，吹打时也不是很用力的，苦恼中！
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lixi559[使用道具]
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发表于 2012-7-10 16:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

消化时间不能根据经验，具体到一个时间上，消化的速度和很多因素有关，如胰酶的浓度，细胞的生长密度，消化时的温度等很多因素有关！应该时刻注意消化时细胞的情况，当细胞之间有间隙时，就可以终止消化，也可以在显微镜下观察，当细胞变圆时，有立体感时，就可以终止消化！希望能对你有帮助，能尽快把细胞养好！
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daod[使用道具]
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发表于 2012-7-10 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是不是所用培养基不适合它生长呀？
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skytree[使用道具]
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发表于 2012-7-10 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

问一下，传代时一定要离心吗？
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lixi559[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般不用，贴壁细胞不会随液倒掉，除非死的没贴上，而对于悬浮细胞传代可以留一半加一半新培养基，所以也不用离心
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