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标题:[求助]将溶解的胎牛血清热灭活还能用吗

huifeng0516[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]将溶解的胎牛血清热灭活还能用吗



我将放在-20冻存的胎牛血清放到4度冰箱过夜后全部融化了，然后放到56度水域里灭活30分钟。可是后来听别人讲应该直接从-20度取出后就放到56度水域里。不知道我这样做会不会产生什么不良后果。如果有的话还能挽救吗？急切盼望大家帮助。
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glass[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一般国产的胎牛血清是需要56度灭活的,如果你的是国产的,你做的步骤是对的.

进口的血清一般不需要灭活,直接分装成小瓶装就可以了

两者均是-20度保存起来,用的时候37度融化就可以了
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caihong[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的做法和你是一样的！一般建议2-8℃解冻血清，也可以在室温解冻，而且在解冻过程中宜轻轻晃动瓶子以混合血清，待血清融化后置于56度水浴中灭活30分钟。如果直接将血清从-20度取出后放到56度水域里，过于急剧的温度变化会造成血清中蛋白变性增加，沉淀增多而影响血清的营养。
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huifeng0516[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢，我的是四季青的胎牛血清。但我问了几个人都是从-20度直接拿去灭活，边灭火边融化而我是放4度融化后灭的活，不知道这样行不行。
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summerxx[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你的做法是对的
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ffooll[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没问题的，放心吧,我是这么做的
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我使用的是室温融化，融化时最好不时摇晃一下，不容易出现蛋白质析出。放在4度过夜融化也可以，不影响使用效果，只是我个人感觉浑浊物相对多了些，不太喜欢。
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leifengta[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
等等，我用的也是四季青的，只是4度过夜融化，没有灭活一样可以养BMSC,为什么呢？
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zhezhe[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用的四季青血清也是如楼主所说：4度冰箱过夜融化，56°水浴灭活30min，这灭活步骤应该没有问题的。

四季青血清有说明：一般以56°，30min来处理已解冻的血清，此加热步骤可以使补体去活化。而补体所参与的反应有：溶细胞活性，平滑肌收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和活性。实验显示即使对血清进行正确的热灭活，对大多数细胞也不需要。经此处理的血清对细胞生长只有微小的促进或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响血清质量而使生长速率降低。建议若非必须可以不需要做热处理这一步。

我8月份时养PC-3细胞，之前用的是别人灭活后的血清，后来自己第一次买血清看说明书后，觉得无必要就没有进行灭活，结果换液几天后细胞出状况了，我发帖求助过，这是链接
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=6806062&sty=3&keywords=PC-3')

有战友应贴说是血清没有灭活原因，后来我进行灭活处理再培养，原来的细胞已经不行啦，后来复苏的细胞长得不错的。当然，还有可能是一直用灭活血清培养的细胞没有适应不灭活的血清造成的。但感觉血清一般还是灭活处理下吧，特别是有关免疫方面的。不过，要是原来就没有灭活，那就按原来的来，培养条件最好不要轻易改变，细胞经不起来回折腾呵呵
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pencil菲[使用道具]
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发表于 2012-7-10 17:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

灭活血清性质相对稳定，便于使用和保存
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