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标题:[求助]是所谓的“黑焦虫”吗

剪刀手520[使用道具]
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[求助]是所谓的“黑焦虫”吗


【求助】我最近发现培养瓶底部长满小黑点,增殖很快,第二天就长满整个培养瓶了,高倍镜下可见其快速运动,不知道这是不是就是所谓的“黑焦虫”呢?本来复苏后细胞数量就不是很多,现在细胞状态越来越差,差不多都死光了?各位战友同志们,有啥好办法呢?
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剪刀手520[使用道具]
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剪刀手520[使用道具]
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剪刀手520[使用道具]
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细胞之间见很多黑色小点,微调细螺旋后可见白色小点,做原地旋转运动,有的也禁止不动,图片后高倍镜下看好像有芽孢结构,检验科的老师说可能是真菌,细胞状态明显不好!郁闷!是不是血清的问题?因为我换其他品牌的血清没有发现这个问题。前段时间有发现类似的情况,这次我还特意把血清用一次性滤器过滤了一遍,结果还是出现问题。各位战友,快来帮帮我!养细胞养的都快崩溃了!………
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dragonkilly[使用道具]
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1.我觉得“黑焦虫”的说法并不科学.
2.我的细胞也出现了同样的问题,刚开始只是小黑点,培养一夜后大量繁殖,整个培养基都是.
3.不知道你是怎么处理的,污染后有没有继续培养,看一下它到底能长成什么样.
3.关于真菌:刚开始我也以为是酵母菌污染,通过出芽生殖增殖,找了几张酵母菌的图片对了一下,好象也很像,不过酵母菌的运动性没有那么强啊,真菌的话,时间长了,应该能看见菌丝的.而且在我的培养基中明显能看到大量微生物围着一个细胞在咬,涂了几张玻片,革蓝氏染色阴性.
4.也不像是细菌,在低倍镜下就能看到.
5.关于血清:应该不是血清的问题,我把所有用到的东西胶原酶,培养基等都做了对照培养,没有什么问题,建议你也试一试.
6.处理措施:现在具体是什么东西,我也说不好.而且没有好的抢救措施.建议你休息一段时间,调整一下心情,也是环境当中的微生物失去寄生的环境,然后重新复苏细胞再培养.关键是一定要严格的无菌操作.
以上是个人的一点经验,希望能对你有所帮助,大家一块努力,共同把细胞养好.
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any333[使用道具]
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个人一点建议,参考从以下几点入手:
一:是否是污染,如果是找出可能的污染源
二:血清问题
1。用的是国产还是进口血清 ,血清质量有保证吗?是不是血清以本身有污染?
2。你用的一次性滤器孔径多大?假如是污染,其大小可以保证将细菌/真菌/其他 去除吗?
3。你的血清是否经过特殊处理过,比如高温灭活会使其营养物质丢失较多,且温度变化大使其中的“小黑点”增多。(看过一篇文章说,血清中的小黑点不是污染是凝集的蛋白质,只是有的厂家滤膜小使得黑点减少,比如GIBCO公司的特级胎牛血清,而有的血清的前期处理没有那么高级的黑点就有可能较多增多,MOREOVER,温度的突然变化太大也会使其增多)

如果你的细胞已经受影响,状态变差,而换其他品牌血清后就不出现这种情况,为何直接换不出现该情况的血清来培养呢 :)

一点拙见 希望能有用
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newway[使用道具]
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一个办法是设对照,别一个你怀疑是血清的话就取一点去摇菌啊.
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我咨询过杭州四季青的技术支持,他们认为黑焦虫其实是蛋白析出,常见于使用储存时间较长的血清,细胞会出现状态差一般不会使细胞很快死掉,而是半死不活的,是缺乏营养的表现。不妨多冲洗几次,然后换新血清,我试过,如果不太多的话能救过来。
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xevin[使用道具]
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和我们的很象。去我的帖子这看一看
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=7529485&sty=1')
是不是黑胶虫,我不敢说,但可以肯定是生物。我们使用环丙沙星0.5ml/瓶,连续用三天把它除掉的。你不妨拿出一两瓶细胞试一试!?!!
ok?!总比坐以待毙好
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