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标题:[求助]不慎犯下低级错误，用超纯水配了mtt

9900[使用道具]
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发表于 2012-7-11 17:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]不慎犯下低级错误，用超纯水配了mtt


不慎犯下低级错误，用超纯水配了mtt,不知在此基础上在加些东西再配成pbs补救？
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tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-7-11 17:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

就这么用吧,影响不大的
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greenbee[使用道具]
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发表于 2012-7-11 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

先用0.22um的滤器过滤MTT，就没有影响的撒。
但是放久了MTT就不要用了。
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2012-7-11 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


呵呵，我也犯过类似错误，请教了高手，她说纯净水配的MTT渗透压和PBS配的不是一样的，会造成低渗状态，影响活细胞形成结晶。补救方法是我找了一包配制PBS的粉剂，可以配2000ml的规格，用天平称了1/40的量（我配的MTT是50ml），加入纯水配的MTT中溶解后再用滤器过滤。办法是笨了点，不过可以供你参考！
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fei1226com[使用道具]
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发表于 2012-7-11 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
PBS粉剂是4种成分混合组成，粉剂直接称量并不能保证4种成分均匀分布，所以也就不能保证配出来液体是等渗或是PH值刚好。最好是直接用等渗的PBS，简单的就用生理盐水（0.9NaCL）配。
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发表于 2012-7-11 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
照你的配法，那MTT的浓度不是稀释一半了吗？
PBS粉剂我是混匀了称量的，可以近似认为是均匀的吧。
还有，你说“即使是刚好，称了1/40的量配50ml的PBS是刚好等渗，与50ml纯水配的MTT液混合后的液体渗透压也只有生理性渗透压的一半，还是低渗状态。”我想可能是你理解错了我的意思，我是把这1/40的PBS粉直接加到50ml用纯水配的MTT里面去啊，不是先用纯水溶解这1/40的PBS粉，再和MTT溶液混合的，难道你的PBS不是用纯水配的吗？
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发表于 2012-7-11 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

发完帖子想了想，你说的按照标准PBS的两倍浓度来配，然后取50ml和原来的MTT溶液混合也是可行的，只是需要再加一份MTT粉，就能保证MTT的浓度正常了。
但是还是不理解你说的“称了1/40的量配50ml的PBS是刚好等渗，与50ml纯水配的MTT液混合后的液体渗透压也只有生理性渗透压的一半，还是低渗状态”是什么意思。能解释解释吗？
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发表于 2012-7-11 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
配2000ml的PBS粉剂是按配2000ml液体时是等渗状态下（等张溶液）的颗粒浓度设置配方的，纯水是无张的溶液，两者等体积混合是则渗透压只有原来的一半。公式：渗透压（混合液C)=（A液渗透压*A液体积+B液渗透压*B液体积）/（混合液总体积）。补救时可用高渗溶液配，由于里面缓冲对的比例不变，所以配出来的高渗溶液与等渗溶液PH值相差不多（缓冲对的二级解离相比一级少的多）。
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发表于 2012-7-11 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

呵呵，我的补救方法也和楼上的差不多哈，在原先错配的mtt溶液里加了NaCl,KCl等配成了pbs，笨啊 谢谢大家的回答
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