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标题:[求助]用塑料培养瓶培养细胞时,塑料瓶怎么灭菌好呢?

gogo[使用道具]
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发表于 2012-7-12 13:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]用塑料培养瓶培养细胞时,塑料瓶怎么灭菌好呢?



我们培养细胞时用塑料瓶来培养,但是那位朋友知道塑料瓶怎么灭菌才能做到彻底灭菌呢?
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ffooll[使用道具]
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发表于 2012-7-12 13:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不能干烤或高压蒸汽灭菌的塑料瓶可以用钴60辐射。
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ffooll[使用道具]
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发表于 2012-7-12 13:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果少的话，在超净台上，无菌操作。用75%酒精漂洗一下，然后在超净台紫外灯下风干，估计也可以。。。不访试一试。。。。
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gogo[使用道具]
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发表于 2012-7-12 13:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我看到一些人用微波炉来灭菌,呵,不知道效果怎么样?
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HP007[使用道具]
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发表于 2012-7-12 13:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用去离子水冲20遍后泡酸过夜。在用水冲刷20遍后烘干过夜。在操净台中把瓶口对准紫外灯管照射一两个小时。以前这样试过。没有污染现象
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HP007[使用道具]
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发表于 2012-7-12 13:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有关塑料器皿如何消毒处理的帖子很多，楼主可search。先转载一法供参考：塑料制品的清洗
(1)用洗涤剂清洗，自来水冲洗数遍。
(2)次强酸洗液浸泡2—6 h。
(3)自来水冲洗10次以上，蒸馏水涮洗3次。
(4)浸泡在70％乙醇1 h以上，备用。
(5)临用前从70％乙醇中取出，在超净台内紫外线照射1 h左右方可使用。也可在洗净后不经70％浸泡，而用塑料袋包好，成箱地去照射6OCo灭菌。

转自：cuturl('http://sky.scnu.edu.cn/life/class/cellbiologylab/experim/lexp/lexp01.asp')
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kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2012-7-12 13:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼上的问一下，好像塑料器皿最好不要洗刷吧，这样可能会破坏表面的一层膜。它是有利于贴壁细胞帖覆的
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mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-7-12 13:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼上说得很对用钴60辐射是最有效的方法
实际上根据我的经验，塑料瓶来培养细胞是一次性的，如果你洗涮了培养瓶，在显微镜下可以看到很多的划痕，所以除非缺钱，一般用后可以扔掉。
当然，如果不出现污染，接连传代，塑料瓶来培养细胞可以用到一个月左右。
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gogo[使用道具]
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发表于 2012-7-12 13:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
,但是我试过用紫外钱来灭菌,效果不是很好,还是有污染的现象.希望大家能提出更好的建议.我很想试着用微波炉来灭菌,但是不知道具体用多大的火,多少分钟,具体怎么操作,请朋友们各抒已见!
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2012-7-12 13:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果原来的瓶子没有污染的话，可是试用一下胰蛋白酶把剩余的细胞消化下来，然后在将要种的细胞种进去，不过最好是同一种细胞．这些过程要早操作台上完成，我试过还没有污染的情况．
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