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标题:[分享帖]血管平滑肌细胞a-actin染色

bohe221[使用道具]
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[分享帖]血管平滑肌细胞a-actin染色



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zwsyrt[使用道具]
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挺不错的!!
是自己养的元代吧?想请教如何剥除外膜?我的由于没剥除干净,成纤维细胞疯长,想知道如何处理。尤其是关于纯化的方法!
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moonlight45[使用道具]
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我也要养原代的平滑肌细胞,不知道外膜怎么剥离会好点,以前没养过啊!请帮帮忙指点一下了,先谢了!!
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bohe221[使用道具]
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Alpha-SMA平滑肌细胞, 来源于人类小肠.


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lagua123[使用道具]
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我也要养原代的平滑肌细胞,不知道外膜怎么剥离会好点,以前没养过啊!请帮帮忙指点一下了,先谢了!!

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你要养哪血管的SMC啊?目前我用刀片刮的,有的效果不理想,成纤维细胞疯长,不知该如何处理呢~!
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moonlight45[使用道具]
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我在养小牛胸主动脉的平滑肌细胞,24号做的具体方法是贴块法,外膜是撕下去的,然后用眼科镊一点点撕下中膜,具体方法我就不写了,但是种植了五天了,还不见细胞出来。28号我又加大了小牛血清的浓度,估计要到百分之二十五了,今天看了一下还是没有细胞,也不知道怎么回事了。你养了很久吗?可以交流一下吗?
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fqswdzd[使用道具]
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老大,向您请教了,血管平滑肌细胞的β-actin不是更具有鉴别意义吗?您这方面是否尝试过啊?我们主要做猪冠脉平滑肌细胞的免疫荧光鉴别,对于如何选择一抗和二抗,您能否指教一二呢?谢谢啊。
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蒲公英[使用道具]
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我做过大鼠胸主动脉平滑肌细胞的原代培养,感觉外膜剥的还不错。用眼科镊(直)将其一端轻轻固定,不要损伤组织,再用一把眼科镊(弯),刮除外膜,要轻柔,如果剥的好,就象脱袜套一样。
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baidukk[使用道具]
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请教前辈们了,对于采用免疫荧光法鉴别血管平滑肌细胞,哪位高手有什么建议么?如何选择荧光抗体和试剂来进行染色那?由于以前从未接触过免疫荧光化学方面的技术,烦请高手指教了!谢谢!
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911[使用道具]
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发一张a-actin阳性的VSMC图片,请大家鉴赏

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老大:请教了,您的染色是怎么做的啊?太漂亮了!急性分离的动脉平滑肌细胞的鉴别和培养的细胞一样吗?拜托了,非常感谢!
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